[发明专利]一种用于检测人类奥美拉唑敏感基因突变位点的试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测人类奥美拉唑敏感基因突变位点的试剂盒，包括CYP2C19‑1引物组，CYP2C19‑2引物组，CYP2C19‑3引物组；本发明以人类伏立康唑用药敏感基因CYP2C19为检测对象，通过特异引物的组合，结合核酸质谱检测技术，从而实现快速，简单，准确的检测相关基因的变异情况。

技术领域

本发明涉及一种用于检测人类奥美拉唑敏感基因突变位点的试剂盒，属于生物医药技术领域。

背景技术

药物基因组学研究表明，奥美拉唑在体内的代谢水平与细胞色素酶P450家族的CYP2C19等基因的表型密切相关；FDA在该药的说明也提出了这一点；因此，用药前检测相关基因的变异情况，能有效辅助奥美拉唑的临床用药；对患者有重要的指导意义。

目前市场上奥美拉唑代谢基因测定技术多采用荧光PCR等技术来进行的；检测通量较小，检测成本较高。

本发明旨在通过单碱基延伸的核酸质谱技术，对人类糖尿病用药敏感基因进行变异检查，从而为个体临床用药提供安全指导。

发明内容

针对上述存在的技术问题，本发明的目的是：提出了一种更加精确以及高效的用于人类奥美拉唑用药敏感基因突变位点的核酸质谱检测试剂盒。

本发明的技术解决方案是这样实现的：一种用于检测人类奥美拉唑敏感基因突变位点的试剂盒，包含CYP2C19-1引物组，CYP2C19-2引物组，CYP2C19-3引物组；其中，

CYP2C19-1引物组由正向引物CYP2C19F1，反向引物CYP2C19R1，以及单碱基延伸引物CYP2C19SP1组成，依次包括如：SEQ ID Nos：21，SEQ ID Nos：22，SEQ ID Nos：91所示的序列；

CYP2C19-2引物组由正向引物CYP2C19F2，反向引物CYP2C19R2，以及单碱基延伸引物CYP2C19SP2组成，依次包括如：SEQ ID Nos：23，SEQ ID Nos：24，SEQ ID Nos：93所示的序列；

CYP2C19-3引物组由正向引物CYP2C19F3，反向引物CYP2C19R3，以及单碱基延伸引物CYP2C19SP3组成，依次包括如：SEQ ID Nos：25，SEQ ID Nos：26， SEQ ID Nos：95所示的序列；

该核酸质谱检测试剂盒的每一反应体系的组成如下：

第一步，多重PCR反应：

引物组a，包括引物CYP2C19F1，CYP2C19R1，CYP2C19F2，CYP2C19R2，CYP2C19F3，CYP2C19R3；

PCR master Mix；

H20；

DNA模板；

第二步：单碱基延伸反应：

上述PCR反应液；

iPLEX延伸混液；

引物组b，包括引物CYP2C19SP1，CYP2C19SP2，CYP2C19SP3；

H2O。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

本发明以人类奥美拉唑用药敏感基因突变位点为检测对象，通过特异性引物的组合以及核酸质谱检测技术，能实现准确，简单，快速的检测人类奥美拉唑用药敏感基因突变位点，而且通量更高，成本更低。

附图说明

下面结合附图对本发明技术方案作进一步说明：