[发明专利]一种油气微生物基因勘探方法

权利要求书

1.一种油气微生物基因勘探方法，包括以下步骤：

S1，确定勘探区域的采样点；

S2，确定正演区域的采样点，所述正演区域的采样点为勘探区域的探区内或邻区的已知井上方的采样点；

S3，设计正演区域采样方案，采样并保存样品；

S4，样品提取DNA；

S5，对所述正演区域的样品进行高通量测序，读取划分到种的OTU值；

S6，建立所述勘探区域的油气指示微生物指纹图谱，识别出该勘探区内，气指示有效菌和/或油指示有效菌；根据OTU值分别计算油指标和/或气指标，比较油指标和/或气指标的数值，确定有效油指标和/或有效气指标；

S7，根据油气指示微生物指纹图谱识别出的气指示有效菌和/或油指示有效菌设计相应的引物，进行荧光定量PCR检测，分别得到采样点的油指示微生物数值和/或气指示微生物数值；

S8，结合微生物成果，地球物理和石油地质等资料，多学科、多领域的技术综合确定油气区。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述已知井包括干井、水井、显示井和工业井中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高通量测序为16S rDNA基因或烃氧化相关基因的高通量测序。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述烃氧化相关的基因包括pmoA基因、mmoX基因、bmoX基因、alk系列基因和P450基因中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述确定有效油指标和/或有效气指标时，在油指标中，油/气数值最大的前5个种，且数值大于2，确定为有效油指标；在气指标中，气/油数值最大的前5个种，且数值大于2，确定为有效气指标。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采样的深度为20-100cm。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采样量为50-100g。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，样品-20℃或者用保护液保存样品。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述保护液含有DNase抑制剂和金属离子螯合剂。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S3步骤的采样中，通过以下步骤确定采样点最适宜的采样深度：

S31，分别在10、20、30、40、50、60、70、80、90、100cm处采样；

S32，检测50cm和60cm采样深度的微生物总量；

S33，比较两个采样深度的微生物总量；

S34，沿两个采样深度微生物总量增多的方向，取最邻近的另一个采样深度检测微生物总量；

S35，重复S33和S34步骤，直至没有样品可以检测；

S36，最佳的采样深度

其中，Hm为最大微生物总量采样深度的对数值，a为常数，为6-9，b为矫正深度，为40-60cm，H为检测微生物总量的各采样深度，Hn为最小微生物总量采样深度的对数值。