[发明专利]一种芽孢杆菌SJ110、杀虫蛋白、vip3-like杀虫基因及应用

说明书

本发明公开了一种芽孢杆菌SJ110、杀虫蛋白、vip3‑like杀虫基因及应用。所述芽孢杆菌SJ110属于东洋芽孢杆菌Bacillus toyonensis，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号CCTCC NO：M2020524。生物活性测定表明菌株SJ110、杀虫蛋白、vip3‑like杀虫基因对甜菜夜蛾、棉铃虫以及秀丽隐杆线虫具有很高的毒性。表明菌株SJ110及其杀虫蛋白、vip3‑like杀虫基因可用于农业害虫的防治。

技术领域

本发明涉及生物防治技术领域，具体涉及一种芽孢杆菌SJ110、杀虫蛋白、vip3-like杀虫基因及应用。

背景技术

芽孢杆菌(如苏云金芽孢杆菌)在生长过程中能够生产对多种昆虫、线虫、原生动物和癌细胞等具有生物活性的多种杀虫因子。如杀虫晶体蛋白(Insecticidal CrystalProteins,ICPs)、几丁质酶、苏云金素以及营养期杀虫蛋白(Vegetative InsecticidalProteins,VIPs)等。不同于传统的化学农药，这些杀虫因子具有对人畜无毒害作用、环境友好以及杀虫谱广且易发酵特点，这将非常的有利于农林病虫防治以及转基因作物的应用。

杀虫晶体蛋白(ICPs)是Bt在生长过程中产生的δ-内毒素，是Bt主要的杀虫因子成分之一，以伴胞晶体的形式在菌体内累积。ICPs主要分为晶体蛋白(Crystal protein,Cry)和胞外溶解性蛋白(Crtolytic protein,Cyt)两类蛋白，其中Cry毒素蛋白是最早应用于农作物害虫的防治Bt毒素蛋白。

营养期杀虫蛋白(Vegetative Insecticidal Proteins VIPs)是在Bt菌株生长对数期所产生形成，其与ICPs蛋白氨基酸序列没有同源性，是一种新型的杀虫蛋白。最早是在1996年Estruch 等人发现了Vip3Aa和Vip3Ab蛋白，该蛋白于细菌的营养期生长阶段开始分泌。在四个Vip 蛋白家族中被发现的超过100个中以Vip3的研究最为深入广泛，且只有Vip3被运用于转基因作物中。

目前，少有研究报道新型东洋芽孢杆菌Bacillus toyonensis及其杀虫蛋白、基因在杀虫方面的应用。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供一种芽孢杆菌SJ110、杀虫蛋白、vip3-like杀虫基因及应用。

本发明技术方案如下：

本发明获得新型芽孢杆菌SJ110及其杀虫蛋白和vip3-like杀虫基因，所述芽孢杆菌SJ110属于东洋芽孢杆菌Bacillus toyonensis，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号CCTCC NO： M2020524，保藏日期2020.09.21，保藏地址为中国·武汉·武汉大学。所述杀虫蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述vip3-like杀虫基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。

另一方面，本发明还提供了所述芽孢杆菌SJ110、所述杀虫蛋白和所述vip3-like杀虫基因在杀虫方面的应用。

进一步的，所述虫为鳞翅目昆虫和/或小杆线虫目昆虫。

进一步的，所述虫为鳞翅目夜蛾科昆虫和/或小杆线虫目小杆科昆虫。

更进一步的，所述虫为棉铃虫、甜菜夜蛾和/或秀丽隐杆线虫。

本发明的有益效果是：

本发明提供一种新芽孢杆菌SJ110、杀虫蛋白及其vip3-like杀虫基因，生物活性测定表明菌株SJ110、杀虫蛋白、vip3-like杀虫基因对甜菜夜蛾、棉铃虫以及秀丽隐杆线虫具有很高的毒性。表明菌株SJ110及其杀虫蛋白、vip3-like杀虫基因可用于农业害虫的防治。

附图说明

图1：A为考马斯亮蓝染色光学显微镜观察；B为扫描电镜观察；