[发明专利]切胶纯化同位素标记核酸探针的装置及刀具

说明书

本发明公开了一种切胶纯化同位素标记核酸探针的装置，由底座（1）和挡板（2）组成，在底座（1）上方设有紫外光源（4），紫外光源（4）通过支架（3）与底座（1）连接，底座（1）上设有显色面板（5）。显色面板（5）为荧光薄层层析板，也可以是石蜡膜。这样，可以通过紫外阴影法可视化定位DNA条带，应用于切胶纯化同位素标记核酸探针的流程。本发明还公开了一种切割电泳胶的刀具，刀头由四个刀片合围而成，这样可以更快地切割电泳胶，在纯化探针的过程中节省时间。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说涉及一种切胶纯化同位素标记核酸探针的方法。本发明还涉及一种切胶纯化同位素标记核酸探针的装置。本发明还涉及一种切割电泳胶的刀具。

背景技术

同位素标记核酸探针具有灵敏度高、不改变核酸序列化学性质、可以检测皮克级目的片段的特性，在生命科学领域广泛使用。在用³²P或³³P进行PCR或体外转录标记寡核苷酸的过程中，由于水解和翻译提前终止等因素，导致产生较短的产物片段。探针比活度越高，其灵敏度也就越高。很多实验依赖于高活性探针，如核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay，RPA)等。制备探针的比活度越高，越容易产生短的产物片段，以及越低的产物得率。为了避免对实验结果造成干扰，常常需要对探针进行切胶纯化，该过程可以有效去除短的产物片段以及在标记反应中添加的模板DNA、转录酶、NTP等其他物质。

国内发明专利CN106047863B公开了一种切胶纯化同位素标记核酸探针的方法。该方法包括如下步骤：步骤一：制备与目标同位素标记核酸探针具备相同碱基性质和碱基序列的核酸片段；步骤二：电泳分离所述核酸片段；步骤三：使用常规染色法定位所述核酸片段在电泳胶上的位置；步骤四：使用另一块与步骤二相同的电泳胶，采用与步骤二相同的条件，电泳分离目标同位素标记核酸探针；步骤五：经过与步骤二相同的时长后，停止电泳，切割步骤四所述电泳胶上的由步骤三所确定的位置处的胶块；步骤六：回收所述胶块中的同位素标记核酸探针。

发明专利CN106047863B提供了一种与同位素接触步骤少、操作同位素时间短的切胶纯化同位素标记核酸探针的方法。该方法通过预先确定电泳结束后同位素标记核酸探针在电泳胶上的具体位置，从而减少操作同位素所需的步骤和时间。该发明专利切胶纯化同位素标记核酸探针方法的不足之处在于：该方法需要使用两块电泳胶，要求两块电泳胶具备相同的化学和物理特性，并且要求在相同的条件下进行电泳。在实际操作过程中，由于是不同的两块电泳胶，而且是先后进行电泳，所以不太容易做到两块电泳胶的化学和物理性质绝对相同，也不太容易做到绝对相同的电泳条件。造成的结果是两块电泳胶上的核酸条带的位置发生偏移，从而降低了该方法切胶纯化探针的成功率。

发明内容

为克服上述切胶纯化同位素标记核酸探针的方法所存在的缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种只需要使用一块电泳胶、一次电泳，即可完成的切胶纯化同位素标记核酸探针的方法。

与此相应，本发明另一个要解决的技术问题是提供一种应用紫外阴影法显示DNA条带的切胶纯化同位素标记核酸探针的装置。

另外，本发明又一个要解决的技术问题是提供一种快速切割电泳胶的刀具。

就切胶纯化同位素标记核酸探针的方法而言，为解决上述技术问题，本发明的方法由以下步骤组成：

步骤一：制备与目标同位素标记核酸探针具备相同碱基性质和碱基序列的核酸片段；

步骤二：电泳分离所述核酸片段和目标同位素标记核酸探针；

步骤三：使用紫外阴影法定位所述核酸片段在电泳胶上的位置；

步骤四：切割探针泳道对应位置处的胶块，回收目标同位素标记核酸探针。

目标同位素标记核酸探针可以是单链DNA、双链DNA、单链RNA或双链RNA中的任一种。