[发明专利]甲基营养型芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种甲基营养型芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用，涉及高效农业技术领域。由甲基营养型芽孢杆菌菌株原粉、硅藻土、羟甲基纤维素钠和亚甲基二萘磺酸钠组成甲基营养型芽孢杆菌剂，并将甲基营养型芽孢杆菌剂作为生长增效剂应用在黄瓜种植中。本发明的甲基营养型芽孢杆菌剂对能促进黄瓜植株和根系的生长，达到增强根系活力的技术效果。

技术领域

本发明涉及高效农业技术领域，尤其涉及一种用于促进黄瓜生长的甲基营养型芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

甲基营养型芽孢杆菌是一种革兰氏阳性，产芽孢的细菌。芽孢杆菌属于细菌界(Bacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、芽孢杆菌和乳杆菌组(Bacilli and Lactobacilli)、芽孢杆菌纲(Bacilli)、芽孢杆菌目(Bacillales)、芽孢杆菌科(Bacillaceae)、芽孢杆菌属(Bacillus)以及其他21个近似属，其中仅芽孢杆菌属就包含200多种菌。

甲基营养型芽孢杆菌不仅可以促进土壤矿物及有机物的分解，为植物提供营养；同时还可以分泌IAA，Butanidiol等植物激素以及小分子气调物质；此外，还可以诱导植物提高自身抗病害能力(ISR)，并可以通过合成脂肽类，细菌素，抗菌蛋白等抑菌物质，以及形成生物菌膜(Biofilm)等物理屏障，而直接帮助植物抵御病原微生物。总的来讲，甲基营养型芽孢杆菌植物亚种是目前国内外公认的无毒安全的植物促生土壤细菌，也是目前我国使用量最为广泛的微生物肥料菌种来源之一。

所以，亟需一种增效作用明显的甲基营养型芽孢杆菌粉状生物菌剂。

发明内容

鉴于上述问题，本发明提供一种用于促进黄瓜生长的甲基营养型芽孢杆菌粉状菌剂及其制备方法和应用，其主要目的是获得一种对黄瓜生长增效作用明显的菌剂。

为实现上述目的，本发明提供了一种用于促进黄瓜生长的甲基营养型芽孢杆菌菌剂，所述甲基营养型芽孢杆菌菌剂由质量比为1:3～4:0.8～1:0.1的甲基营养型芽孢杆菌菌株原粉、硅藻土、羟甲基纤维素钠和亚甲基二萘磺酸钠(NNO)组成。

进一步，优选的，所述甲基营养型芽孢杆菌为甲基营养型芽孢杆菌N5菌株。

本发明还保护一种所述甲基营养型芽孢杆菌菌剂的制备方法，将甲基营养型芽孢杆菌N5菌株接种在LB固体平板培养基上划线培养，进行菌种活化；将活化后的菌落，接种至250mL pH＝7的NB液体培养基，置于28℃、120r/min振荡培养24h，获得种子液；将5mL种子液接种至液体发酵培养基中，置于28℃、120r/min振荡培养48h后收集菌体，将菌体重悬浮于无菌双蒸馏水中，用无菌双蒸馏水调整菌悬液浓度为6.5×10¹⁰cfu/mL，进行喷雾干燥，即制得甲基营养型芽孢杆菌株原粉；

将所述甲基营养型芽孢杆菌菌株原粉、硅藻土、羟甲基纤维素钠和NNO按照质量比为1:3～4:0.8～1:0.1混合，形成甲基营养型芽孢杆菌菌剂。

进一步，优选的，所述液体发酵培养基的成分包括：玉米粉2％、酵母膏0.5％、麸皮5％、黄豆粕0.7％和MnSO₄0.1％，以重量百分比计。

进一步，优选的，所述液体发酵培养基的pH为8.0。

进一步，优选的，所述甲基营养型芽孢杆菌菌剂经气流粉碎机粉碎至细度80目筛通过率为98％。

本发明还保护甲基营养型芽孢杆菌菌剂在黄瓜种植中作为生长增效剂的应用。

本发明的有益效果如下：

本发明所提供的甲基营养型芽孢杆菌菌剂，甲基营养型芽孢杆菌菌剂的发酵产物有产铁载体和吲哚乙酸等促生物质，因此二次发酵生产的发酵产物对黄瓜生长有较好的促生作用，能促进黄瓜植株和根系的生长，增强根系活力。