[发明专利]一种活性益生菌冻干粉制备方法及在皮肤和妇科疾病中的应用

权利要求书

1.一种活性益生菌冻干粉制备方法，其特征在于：将乳酸杆菌CGMCC NO.12422,嗜酸乳酸杆菌CCTCC NO：M2011124用MRS培养基活化，培养并收获菌体；将二个菌体配制相同浓度后按照1:1体积比混合，再用等体积的0.85%的生理盐水充分悬浮混合菌体，离心收集菌体，备用；将上述混合后的菌体按照重量比100:1加入SEQ ID NO：1的抗菌肽后一起加入到保护剂中，其中保护剂与菌体的体积比为3∶1，混合均匀备用；在进行冷冻干燥之前，样品需在-80℃超低温冰箱预冻3 h，随后采用三段式冷冻干燥，在512 Pa压力下冻干6h，随后在256Pa压力下冻干5h，之后在103 Pa下冻干直至获得粉末产品；其中保护剂质量浓度，g/100mL蒸馏水的组成为海藻糖1%，谷氨酸钠0.5%，脱脂乳1%，抗坏血酸0.25%，葡聚糖0.25%。

2.一种冻干菌剂，采用活性益生菌冻干粉制备方法制备；其特征在于：活性益生菌冻干粉制备方法为：将乳酸杆菌CGMCC NO.12422,嗜酸乳酸杆菌CCTCC NO：M2011124用MRS培养基活化，培养并收获菌体；将二个菌体配制相同浓度后按照1:1体积比混合，再用等体积的0.85%的生理盐水充分悬浮混合菌体，离心收集菌体，备用；将上述混合后的菌体按照重量比100:1加入SEQ ID NO：1的抗菌肽后一起加入到保护剂中，其中保护剂与菌体的体积比为3∶1，混合均匀备用；在进行冷冻干燥之前，样品需在-80 ℃超低温冰箱预冻3 h，随后采用三段式冷冻干燥，在512 Pa压力下冻干6h，随后在256 Pa压力下冻干5h，之后在103 Pa下冻干直至获得粉末产品；其中保护剂质量浓度，g/100mL蒸馏水的组成为海藻糖1%，谷氨酸钠0.5%，脱脂乳1%，抗坏血酸0.25%，葡聚糖0.25%。

3.一种药物组合物，其中含有权利要求2所述的冻干菌剂。

4.如权利要求3所述的药物组合物，其中药物组合物的剂型包括固体剂型、液体剂型或外用剂型。

5.如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述外用剂型包括乳膏、喷雾剂、凝胶、卫生棉条、卫生巾、散剂或霜剂。

6.一种阴道抑菌载体的制备方法，包括如下步骤：(1)将基体材料聚乙烯醇溶解于60℃-100℃的水中，完全溶解后，冷却至40℃-55℃，加入权利要求2的菌剂并混合均匀，得益生菌层材料； (2)将明胶加热使其熔化，对其进行高压高温灭菌，再冷却至50℃-60℃，得明胶凝胶，即为隔离层材料；(3)取适量的益生菌层材料，加入模具中，在室温条件下冷却成型，得益生菌层；50℃-60℃条件下在益生菌层表面均匀涂覆配方量的隔离层材料，室温条件下冷却成型，得隔离层包覆益生菌层的半成品；最后在半成品表面均匀涂覆配方量的抑菌层材料中，于-5℃-0℃温度下预冷冻成型，随后在室温下进一步凝固成型，包装即得成品。

7.权利要求3所述的药物组合物在用于制备治疗阴道炎的药物中的用途。