[发明专利]一种丹参组培快繁的方法

权利要求书

1.一种丹参组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、选取供品系试验的温室大棚和试验地；

S2、对接种外植体进行选取；

S3、配制激素类母液备用；

S4、配制培养基备用；

S5、对培养基、接种室和超净工作台进行灭菌处理；

S6、对外植体进行灭菌处理；

S7、对已灭菌的外植体进行切割和接种；

S8、对接种后的外植体进行培养；

S9、将不定芽从愈伤中分离开，转接到相同培养基继续继代培养，并进行生根培养；

S10、选取品种纯正、健康、叶色浓绿、组织结实无玻璃化现象、无徒长现象、根系白且粗壮、有多条、无变异的培育苗；

S11、对选取的培育苗进行训苗。

2.根据权利要求1所述的一种丹参组培快繁的方法，其特征在于，根据S2中的操作步骤，取材前对植株的叶片大小形状、叶色、株型进行鉴定，确保该植株保持原有品种特性，选择丹参生长旺盛的温暖季节，晴朗天气，进行取材，选择生长健壮的植株，靠近茎尖部位的幼嫩叶片，取回后尽量3天内接种完。

3.根据权利要求1所述的一种丹参组培快繁的方法，其特征在于，根据S3中的操作步骤，包括以下步骤：

S301、用电子分析天平准确称取激素类药品NAA和6－BA各0.1g，NAA先用少量0.1mol∕LNaOH或95%酒精溶解；

S302、6－BA用0.1mol∕L的HCL溶解；

S303、将已溶解的激素类药品NAA和6－BA溶液分别加蒸馏水定容至100ml，即成浓缩至1mg∕ml的激素类母液。

4.根据权利要求1所述的一种丹参组培快繁的方法，其特征在于，根据S4中的操作步骤，所述培养基的配制包括以下步骤：

S401、按4.74 g/L比例，称取适量MS培养基粉末溶解于适量蒸馏水，按0.7%琼脂和3%蔗糖加入后加热至琼脂完全溶解，蒸馏水定容至所需体积，按培养基激素配比加入相应激素量，后用1mol/L NaOH溶液和1mol/L HCl溶液调节pH值，趁热分装至培养瓶中，养基体积占培养瓶的1/5-1/4，制得MS培养基；

S402、按2.47g/L比例 称取适量1/2 MS培养基粉末溶解于适量蒸馏水，按0.7%琼脂和3%蔗糖加入后加热至琼脂完全溶解，蒸馏水定容至所需体积，按培养基激素配比加入相应激素和容量，后用1mol/L NaOH溶液和1mol/L HCl溶液调节pH值，趁热分装至培养瓶中，培养基体积占培养瓶的1/5-1/4，制得1/2MS培养基。

5.根据权利要求1所述的一种丹参组培快繁的方法，其特征在于，根据S5中的操作步骤，包括以下步骤：

S501、培养基灭菌：将分装好的培养基，准备充足的蒸馏水和滤纸，一起放入高压灭菌锅内，进行高温高湿高压灭菌，121℃高压灭菌20分钟，备用；

S502、接种室灭菌：在接种前4h用甲醛与高锰酸钾混合薰蒸接种室，并打开紫外灯照射30min；

S503、超净工作台灭菌：正式接种前半小时左右，打开超净工作台上的紫外灯和风机，20-30min后接种。

6.根据权利要求1所述的一种丹参组培快繁的方法，其特征在于，根据S6中的操作步骤，从温室取回的叶片材料，经自来水冲洗干净，用肥皂、洗衣粉或吐温洗涤，用无菌水洗2-3次，放入工作台，倒入70%-75%的酒精中浸泡约30s，再在0．1％的升汞中浸泡5-10min，或在10％的漂白粉上溶液中浸泡10-15min，浸泡时可进行搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，然后用无菌水冲洗3-5次。