[发明专利]一种生物吸附材料及制备方法、病毒吸附系统和辅助透析循环系统有效
申请号: | 202011261308.3 | 申请日: | 2020-11-12 |
公开(公告)号: | CN112375737B | 公开(公告)日: | 2023-03-28 |
发明(设计)人: | 史剑;何小舟;薛冬;孙阳洋;邢兆宇;钱欢欢;马菲 | 申请(专利权)人: | 常州市第一人民医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;A61M1/36 |
代理公司: | 常州市科谊专利代理事务所 32225 | 代理人: | 孙彬 |
地址: | 213000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 吸附 材料 制备 方法 病毒 系统 辅助 透析 循环系统 | ||
1.一种生物吸附材料,其特征在于,所述生物吸附材料是高表达hACE2、hTMPRSS2、hCD55和hCD59蛋白的细胞株,且所述细胞株为敲除了组织凝血激酶的人血管内皮细胞,所述人血管内皮细胞为EAhy926,所述细胞株能够吸附SARS-CoV-2病毒。
2.一种如权利要求1所述的生物吸附材料的制备方法,其特征在于,其包括如下步骤:采用基因敲除的方法敲除人血管内皮细胞的组织凝血激酶,然后在敲除组织凝血激酶的人血管内皮细胞株中,通过慢病毒转染,获得高表达hACE2、hTMPRSS2、hCD55和hCD59蛋白的细胞株,所述人血管内皮细胞为EAhy926,所述细胞株能够吸附SARS-CoV-2病毒。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述基因敲除的方法为CRISPR-Cas9基因编辑技术,通过CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除人血管内皮细胞的组织凝血激酶,然后通过慢病毒转染构建同时稳定高表达hACE2和hTMPRSS2的细胞株,然后以高表达hACE2和hTMPRSS2的细胞株为基础,通过慢病毒转染构建同时稳定高表达hCD55和hCD59的细胞株。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括获得将同时高表达hACE2、hTMPRSS2、hCD55和hCD59蛋白的细胞株用NF-κB信号通路抑制剂进行处理。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述NF-κB信号通路抑制剂为QNZ,QNZ的使用浓度为0.3-0.7μmol/L。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,QNZ的使用浓度为0.5μmol/L。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,在体外用QNZ处理8-12h。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,用QNZ处理8-12h后,用无血清培养基清洗细胞,消化收集细胞。
9.一种病毒吸附系统,其特征在于,其包括生物反应器,所述生物反应器中接种有权利要求1所述的生物吸附材料或权利要求2-8任一项所述的制备方法制得的生物吸附材料。
10.根据权利要求9所述的病毒吸附系统,其特征在于,所述生物反应器为生物人工肝系统中的生物反应器。
11.根据权利要求9所述的病毒吸附系统,其特征在于,所述病毒吸附系统是吸附通过ACE2感染人体的病毒的吸附系统。
12.根据权利要求11所述的病毒吸附系统,其特征在于,所述病毒吸附系统是吸附新型冠状病毒的吸附系统。
13.一种辅助透析系统,其特征在于,其包括辅助透析装置,所述辅助透析装置中连接有权利要求9-12任一项所述的病毒吸附系统。
14.根据权利要求13所述的辅助透析系统,其特征在于,所述辅助透析装置为免疫吸附机。
15.一种包被有权利要求1所述的生物吸附材料或权利要求2-8任一项所述的制备方法制得的生物吸附材料的免疫吸附器。
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