[发明专利]一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体

说明书

本发明公开一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，最后加入的壳多糖水溶液，继续反应，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；将紫杉醇溶液与步骤一制备的壳多糖混合，加入渗透液，超声处理，处理后测量混合液的PH值；将纳米凝胶制成圆片状，将步骤二处理后的溶液静置，去除上层无色透明液体，将下层沉淀至于纳米凝胶制成的圆片上，干燥冷冻处理，获得细胞载体。本发明制备方法简单，可操作性行强，材料获取简单，有利于降低细胞载体的生产成本，细胞载体基于壳多糖，提高了细胞的生存几率和生产时长，有利于细胞的转运和培养。

技术领域

本发明涉及一种细胞保存技术领域，具体是一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体。

背景技术

载体指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子，三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。理想的药物载体除了具备适当的粒径及粒形、较高的载药率及包封率外，更重要的是可生物降解，毒性低甚至没有毒性，这就要求药物载体使用可生物降解型高分子材料，生物可降解材料成为国内外科研人员关注的重点，是近几十年来高分子材料领域的一大研究热点，生物可降解材料药物载体按其来源分类，可以分为人工合成的高分子聚合物体系和天然的高分子体系，如聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯/聚丙交酯共聚物(PLGA)、聚乙交酯(PGA)、聚己内酯(PCL)和聚丙交酯-聚己交酯(PLCL)等都属于人工合成的高分子聚合物；天然高分子材料可以分为多糖类、蛋白质类和其他类，用于载药系统的多糖类主要有壳聚糖、淀粉及海藻酸盐等，蛋白质类主要有明胶、清蛋白等。按照形态和类型，生物可降解材料载体的载药形式又可以分为溶胶与胶束、纳米囊与囊泡、纳米粒与纳米球等类型。此外，根据在体内的降解代谢途径，生物可降解材料载体又可被分为生物降解和非生物降解两种，生物降解型载体材料通过调节降解速率，进而可以控制所载药物或基因多肽的释放，受到越来越多的关注和研究。另外，近年来还出现了多功能的复合纳米载体，其构成包括纳米载体(高分子化物)、活性组分(治疗药物)、靶向分子(抗体)和聚乙二醇修饰成分等。比如多肽连接的金纳米粒，Farokhzad等用前列腺癌特异膜抗体连接PLGA纳米粒包载多西紫杉醇等。

壳多糖又称几丁质，为N-乙酰葡糖胺通过β连接聚合而成的结构同多糖，广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳和真菌的胞壁中,也存在于一些绿藻中，壳多糖一个N-氨基乙酰化的多聚化合物,主要来自于自然界壳类的动植物外壳如螃蟹和虾，壳多糖及其衍生物已被广泛应用，壳多糖通常以其N氨基乙酰化程度和/或者糖单元结构的聚合程度来表示其一些化学或物理特征.在一定程度上,DA代表着某一壳多糖骨架上自由氨基的数目多少,DA值越大,壳多糖骨架上自由氨基被乙酰化的百分比越大,自由氨基的百分率越低；DP代表着某一壳多糖分子的大小,DP值越大,说明该壳多糖分子是由更多的单糖分子构成,分子量更大；在一定质量时,壳多糖的DP越大,其所含的壳多糖分子个数越少，因此,在一定程度上DA和DP影响着壳多糖的物理化学性质和生物学活性。针对这种情况，现提出一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，降低细胞载体的生产成本，提高细胞载体的给药安全。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，本发明制备方法简单，可操作性行强，材料获取简单，有利于降低细胞载体的生产成本，细胞载体基于壳多糖，提高了细胞的生存几率和生产时长，有利于细胞的转运和培养，细胞载体免疫排斥反应概率小，避免了细胞培养中因为细胞载体的问题失败。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种基于壳多糖的凝胶状材料细胞载体，利用以下步骤制成：

步骤一：制备壳多糖，将制备壳多糖的原材料溶解于处理溶液中，搅拌，搅拌过程中加入提取液，20～45℃反应1～1.5h，最后加入1～3％的壳多糖水溶液，继续反应1～3h，将反应液透析并冷冻干燥，获得壳多糖；