[发明专利]一组柯萨奇A组6型病毒突变株及其应用

说明书

本发明涉及一组柯萨奇A组6型病毒突变株及其应用，包括强毒力突变株和弱毒力突变株，所述强毒力突变株中单独或任意组合的含有如下位点：VP1蛋白：124M、242V、VP2蛋白：57D、VP3蛋白：135P。所述弱毒力突变株中单独或任意组合的含有如下位点：VP1蛋白：124V、242I、VP2蛋白：57D、VP3蛋白：135P。

技术领域

本发明属于医药生物领域，具体而言，涉及一组柯萨奇A组6型病毒突变株及其应用。

背景技术

手足口病(hand-foot-and-mouth disease，HFMD)是全球性传染病，以婴幼儿发病为主。该病的主要症状表现为手、足、口腔、臀部的皮疹、斑丘疹、疱疹，发热或不发热[1]。绝大多数HFMD患儿感染5至7天后可自愈，小部分患儿病情发展快，在发病1至5天后发展为重症病例，出现严重的中枢神经系统并发症，包括急性无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹等与肺水肿、心肌炎等呼吸及循环功能障碍，甚至可导致死亡[2-3]。

引起HFMD的病毒属于小RNA病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属(Enteroviruse)，包括柯萨奇病毒(Coxsackie virus)A组的2、4、5、6、7、9、10、16型，B组的1、2、3、4、5、13型，肠道病毒71型(Human enterovirus 71,EV-71)，埃可病毒(ECHO-viruses)等[11-14]。2008年5月2日，中国卫生部将HFMD列入传染病防治法规定的丙类传染病进行管理。根据文献报道，EV-71、CV-A6、CV-A10、CV-A16和CV-A4是引起目前HFMD的主要病原体[15]。

早期研究表明CV-A16和EV-71是HFMD流行的主要病原体[16-21]。但是自2008年CV-A6引起芬兰HFMD暴发后，数年内在欧洲、美洲和亚洲等多个国家和地区均有CV-A6相关HFMD的流行[22-25]。特别是，CV-A6已成为中国主要的循环血清型[26-29]。本实验室2016-2017年在湖北省襄阳市部分地区收集了3703份HFMD患儿临床样本，通过核酸分型确诊CV-A6阳性样本共1938份，占比60.26％，已经成为导致该地区发生HFMD的最主要血清型。目前，市面上现存的EV-71疫苗对CV-A6引起的HFMD无法形成有效的交叉保护。为了更全面的预防HFMD，需要研发包含CV-A6在内的多种肠道病毒抗原的多价HFMD疫苗。

在疫苗的研发过程中，需要建立合适的感染模型和疾病模型对候选疫苗的效力进行评价，最常用的感染模型仍然是小鼠模型。国际学术期刊已发表的文章更多采用的是小日龄乳鼠的被动免疫保护模型，包括使用抗血清的预防性和治疗性被动保护模型和母传抗体被动免疫保护模型。其中，EV-71、CV-A16、CV-A6、CV-A10全病毒灭活疫苗及相应的病毒样颗粒的保护效力已有相关报道[30-31]。被动免疫保护模型虽证实了中和抗体的保护作用，但不能模拟自然状态下疫苗免疫和病毒感染的过程，不能反映动物接种疫苗后的体液和细胞免疫应答及攻毒后的保护效力。所以更好的用于评价疫苗效力的动物模型是主动免疫保护模型，即使用候选疫苗直接对小鼠进行免疫并对小鼠进行攻毒。而大日龄小鼠对包括CV-A6在内的柯萨奇A组病毒不敏感，使攻毒前没有初次免疫和加强免疫的窗口期，是主动免疫保护模型建立的技术障碍。

参考文献

1.WHO.A guide to clinical management and public health response forhand,foot and mouth disease[M].WHO,2011.

2.Prager P,Nolan M,Andrews IP,et al.Neurogenic pulmonary edema inenterovirus 71encephalitis is not uniformly fatal but causes severe morbidityin survivors[J].Pediatr Crit Care Med,2003,4(3):377–381.