[发明专利]重组蛋白hID2在制备治疗结肠炎药物中的应用

说明书

本发明涉及一种重组人ID2（inhibitor of DNA binding 2）蛋白，通过构建人ID2基因重组质粒并在大肠杆菌中高效表达制备重组蛋白hID2。重组蛋白hID2在治疗溃疡性结肠炎方面具有显著的疗效，无不良反应和副作用。

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体涉及一种重组人ID2(inhibitor of DNA binding2)蛋白，其通过构建人ID2基因重组质粒并在大肠杆菌中高效表达而制备，用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物。

技术背景

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)，是一种原因未明的慢性非特异性肠道疾病，病变主要位于结肠的黏膜层，常累及直肠和远端结肠，也可遍及整个结肠，呈连续性弥散性分布。该病见于任何年龄，以25-40岁较为多见，除少数患者起病急骤外，大多数患者起病缓慢，且病情轻重不一。腹痛、腹泻、黏液便及脓血便、里急后重为主要临床症状，组织病理学表现为黏膜下水肿、炎细胞浸润、杯状细胞减少以及隐窝数量减少，内镜下结肠呈糜烂、溃疡等炎症表现，且部分患者伴有肠外表现，如眼睛、关节、肝脏和皮肤的损伤。根据国内外流行病学统计数据显示，UC的发病率和患病率呈逐年上升的趋势，且具有癌变趋势，给患者带来了极大的身体和精神负担，也给家庭和社会带来了极大的经济负担，被世界卫生组织(WHO)列为现代难治病之一。

现有针对溃疡性结肠炎的主要治疗药物包括：(1)氨基水杨酸类，如水杨酸偶氮磺胺吡啶，是治疗UC的经典药物，对于UC的缓解率达80％以上，但恶心、呕吐、头痛、食欲不振等不良反应发生率较高；(2)糖皮质激素，对于抑制UC急性活动性炎症有效，但糖皮质激素易引起肥胖，药物价格较高，患者难以长期维持治疗；(3)免疫抑制剂，易发生免疫相关不良反应，且部分患者对现有的药物不产生应答，其实际应用受到一定的限制；(4)英夫利昔单抗，作为被美国食品药物管理局(FDA)批准用于治疗肠炎的第一个生物大分子蛋白治疗药物，其有一定的临床疗效，但输血反应、感染、恶性肿瘤、自身免疫性疾病等不良反应的发生风险也随之提高。目前尚没有理想的治疗肠炎的药物。因此，开发具有良好效果且安全性较高的治疗肠炎的新型药物具有十分重要的意义。

分化抑制因子2(inhibitor of DNA binding 2，ID2)作为ID蛋白家族成员之一(ID1-ID4)，属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix，HLH)转录因子家族，编码基因定位于2p25染色体上，由两个高度保守性的α螺旋和两螺旋之间保守性差的袢环区段构成，通过螺旋结构上疏水基团的相互作用与其他HLH转录因子结合成四螺旋束的同二聚体或异二聚体，实现对DNA结合和转录的调节功能。有研究报道，ID2在促进细胞增殖、抑制细胞分化，血管生成和肿瘤发生等方面有多种重要的生物学作用，但ID2在溃疡性结肠炎中的作用还未有相关报道。

发明内容

发明人一直致力于研究溃疡性结肠炎的发病机理和治疗药物，发现重组蛋白hID2能够明显的降低由DSS诱导的溃疡性肠炎模型中小鼠的发病程度，无不良反应和副作用。

本发明人进行的试验表明，通过构建人ID2基因重组质粒并在大肠杆菌中高效表达制备的重组蛋白hID2能够显著减少疾病小鼠的体重下降百分率、降低疾病活动指数、减轻结肠组织病理损伤，同时也能显著降低促炎细胞因子的产生以及促进黏蛋白-2(Muc2)的表达，无不良反应和副作用。提示重组蛋白hID2能够作为治疗或者缓解溃疡性结肠炎的药物，为临床治疗溃疡性结肠炎提供新的选择。

本发明提供一种通过构建人ID2基因重组质粒并在大肠杆菌高效表达制备的重组蛋白hID2在制备治疗肠炎药物中的应用。

本发明通过试验直接证明了重组蛋白hID2在溃疡性结肠炎方面的有效性，该效果同样可以扩展至对一般的肠炎也具有治疗作用。

根据试验结果表明，重组蛋白hID2在所述治疗肠炎引起的腹痛、腹泻、便血、里急后重方面有作用，可以起到治疗或缓解的作用。

本发明中的重组蛋白hID2通过腹腔注射方法给药，给药剂量5mg/kg。