[发明专利]一种提高目标蛋白回收率的层析方法

权利要求书

1.一种提高目标蛋白回收率的层析方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1：样品溶液处理：以含有目标蛋白的溶液为原料，加入盐类，盐类为硫酸盐或柠檬酸盐或乙酸盐或其组合，调节pH值高于或低于目标蛋白等电点1个单位以上，得到处理后的样品溶液，硫酸盐为硫酸镁或硫酸钠或硫酸铵，柠檬酸盐为柠檬酸钠，乙酸盐为乙酸钠或乙酸铵,盐类加入量为0.05~0.5mol/L；

S2：进行吸附层析：取层析介质装填层析柱；

S3：控制处理后的样品溶液上样温度，样品溶液上样温度为25~30℃，进行层析操作,层析过程中上样、冲洗与洗脱流速为60~210cm/h；

步骤S1中目标蛋白为胰岛素或胰岛素类似物或蛋白酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中层析介质为亲和层析填料或大孔吸附层析填料或离子交换层析填料或反相层析填料。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述调节pH值的酸性物质为磷酸或冰乙酸或柠檬酸或盐酸；调节pH值的碱性物质为氢氧化钠或氨水或氢氧化钾。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中：

层析过程如下：

①、平衡：使用平衡液冲洗层析柱；

②、上样：将处理后的样品上柱；

③、冲洗：使用平衡液或冲洗液冲洗；

④、洗脱：使用洗脱液洗脱，同时对主峰进行收集；

⑤、再生：使用再生液对填料进行再生处理。