[发明专利]多突变位点的逆转录酶突变体

权利要求书

1.一种M-MLV酶突变体，其特征在于，所述M-MLV酶突变体在第313位氨基酸残基、第583位氨基酸残基、和第607位氨基酸残基发生突变；并且，第313位的氨基酸残基位点突变为Gln，第583位的氨基酸残基位点突变为Asn，第607位的氨基酸残基位点突变为Lys，其中氨基酸残基编号对应于SEQ ID NO.1所示的编号。

2.如权利要求1所述的M-MLV酶突变体，其特征在于，所述M-MLV酶突变体的氨基选序列与SEQ ID NO.1相比具有至少约80％的同源性；更优选地，具有至少约90％的同源性；最优选地，具有至少约95％的同源性；如具有至少约96％、97％、98％、99％的同源性。

3.一种多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子编码权利要求1所述的M-MLV酶突变体。

4.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求3所述的多核酸分子。

5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求4所述的载体或染色体整合有权利要求3所述的多核酸分子。

6.如权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为原核细胞、或真核细胞。

7.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的M-MLV酶突变体。

8.一种制备权利要求1所述的M-MLV酶突变体的方法，包括步骤：

(i)在适合的条件下，培养权利要求5所述的宿主细胞，从而表达出所述的M-MLV酶突变体；和

(ii)分离所述的M-MLV酶突变体。

9.权利要求1所述的M-MLV酶突变体在制备逆转录检测试剂或逆转录试剂盒中的用途。

10.一种RNA逆转录方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(1)提供含有RNA的样品；

(2)逆转录反应：

使用权利要求1所述的逆转录酶突变体对步骤(1)提供的含有RNA的样品进行逆转录反应。