[发明专利]一种里氏木霉发酵高产纤维素酶的方法有效
申请号: | 202011270054.1 | 申请日: | 2020-11-13 |
公开(公告)号: | CN112175842B | 公开(公告)日: | 2022-12-27 |
发明(设计)人: | 汤超;陶程程 | 申请(专利权)人: | 上海汉禾生物新材料科技有限公司;武汉迪因生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/38;C12N9/42;C12R1/885 |
代理公司: | 北京中知星原知识产权代理事务所(普通合伙) 11868 | 代理人: | 艾变开 |
地址: | 201114 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 里氏 发酵 高产 纤维素酶 方法 | ||
1.一种里氏木霉发酵产纤维素酶的方法,其特征在于,在里氏木霉发酵培养阶段,通过流加诱导碳源和氮源混合物进行补料,所述诱导碳源是生物质材料酶解产物与槐糖诱导剂按照(3-5):(7-9)的比例混合得到,所述诱导碳源的可发酵糖总含量为350-380 g/L;
所述生物质材料酶解产物通过如下方法制备得到:取15-17%(w/v)预处理生物质材料,按照材料质量加入10-14 FPU/g的纤维素酶液,50-60℃、pH 4.8-5.0、150-180 rpm条件下反应24-36 h,其中,预处理生物质材料通过如下方法制备得到:将植物秸秆粉碎至1-3 cm的粗颗粒,加水混合后投入气爆罐,当气爆罐内蒸汽压力达到1.43-1.53 MPa后迅速释放罐内压力,将罐内材料粉碎为0.5-1 mm的粉末,烘干,得到预处理生物质材料;
所述槐糖诱导剂通过如下方法制备得到:取50%(w/v)葡萄糖溶液,添加20-25 CBU/g的β-葡萄糖苷酶,50-60℃、pH 4.8-5.0、180-200 rpm的条件下反应24-36 h;流加补料时间为发酵后24-26 h后;
所述诱导碳源的流加总量为发酵体系质量的3-4%,诱导碳源流加方式以及流加补料过程中碳氮比为:
发酵时间段 诱导碳源流加量(%) 流加调控碳氮比 24-36h 12 10∶1 36-48h 16 9∶1 48-60h 20 8∶1 60-72h 24 7∶1 73-84h 16 9∶2 84-96h 12 4∶1
所述氮源是玉米浆和硫酸铵的混合物,玉米浆与硫酸铵的流加配比为:
发酵时间段 硫酸铵与玉米浆质量比 24-36h 1∶1 36-48h 2∶1 48-60h 3∶1 60-72h 4∶1 73-84h 4.5∶1 84-96h 5∶1
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