[发明专利]一种里氏木霉发酵高产纤维素酶的方法有效

专利信息
申请号: 202011270054.1 申请日: 2020-11-13
公开(公告)号: CN112175842B 公开(公告)日: 2022-12-27
发明(设计)人: 汤超;陶程程 申请(专利权)人: 上海汉禾生物新材料科技有限公司;武汉迪因生物科技有限公司
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12N1/38;C12N9/42;C12R1/885
代理公司: 北京中知星原知识产权代理事务所(普通合伙) 11868 代理人: 艾变开
地址: 201114 上海市闵*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 里氏 发酵 高产 纤维素酶 方法
【权利要求书】:

1.一种里氏木霉发酵产纤维素酶的方法,其特征在于,在里氏木霉发酵培养阶段,通过流加诱导碳源和氮源混合物进行补料,所述诱导碳源是生物质材料酶解产物与槐糖诱导剂按照(3-5):(7-9)的比例混合得到,所述诱导碳源的可发酵糖总含量为350-380 g/L;

所述生物质材料酶解产物通过如下方法制备得到:取15-17%(w/v)预处理生物质材料,按照材料质量加入10-14 FPU/g的纤维素酶液,50-60℃、pH 4.8-5.0、150-180 rpm条件下反应24-36 h,其中,预处理生物质材料通过如下方法制备得到:将植物秸秆粉碎至1-3 cm的粗颗粒,加水混合后投入气爆罐,当气爆罐内蒸汽压力达到1.43-1.53 MPa后迅速释放罐内压力,将罐内材料粉碎为0.5-1 mm的粉末,烘干,得到预处理生物质材料;

所述槐糖诱导剂通过如下方法制备得到:取50%(w/v)葡萄糖溶液,添加20-25 CBU/g的β-葡萄糖苷酶,50-60℃、pH 4.8-5.0、180-200 rpm的条件下反应24-36 h;流加补料时间为发酵后24-26 h后;

所述诱导碳源的流加总量为发酵体系质量的3-4%,诱导碳源流加方式以及流加补料过程中碳氮比为:

发酵时间段诱导碳源流加量(%)流加调控碳氮比
24-36h1210∶1
36-48h169∶1
48-60h208∶1
60-72h247∶1
73-84h169∶2
84-96h124∶1

所述氮源是玉米浆和硫酸铵的混合物,玉米浆与硫酸铵的流加配比为:

发酵时间段硫酸铵与玉米浆质量比
24-36h1∶1
36-48h2∶1
48-60h3∶1
60-72h4∶1
73-84h4.5∶1
84-96h5∶1

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