[发明专利]同时检测BK病毒和JC病毒的引物组和探针组及用途在审
申请号: | 202011270292.2 | 申请日: | 2020-11-13 |
公开(公告)号: | CN112522440A | 公开(公告)日: | 2021-03-19 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 苏州奥根诊断科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 王鑫 |
地址: | 215000 江苏省苏州市工业*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同时 检测 bk 病毒 jc 引物 探针 用途 | ||
1.一种同时检测BK病毒和JC病毒的引物组,其特征在于,所述的引物组是基于如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列设计的。
2.根据权利要求1所述的同时检测BK病毒和JC病毒的引物组,其特征在于,所述引物组包括上游引物BJ-F和下游引物BJ-R,上游引物BJ-F核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,下游引物BJ-R核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.一种同时检测BK病毒和JC病毒的探针组,其特征在于,所述的探针组是基于如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列设计的。
4.根据权利要求3所述的同时检测BK病毒和JC病毒的探针组,其特征在于,所述探针组包括探针BK-P和探针JC-P,探针BK-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,探针JC-P的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
5.根据权利要求3或4所述的同时检测BK病毒和JC病毒的探针组,其特征在于,所述探针BK-P和探针JC-P各自的5’端修饰有荧光报告基团,3’端修饰有荧光淬灭基团;
可选的,所述的荧光报告基团选自6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素、VIC荧光染料、四氯-6-羧基荧光素、羧基-X-罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素、磺酰罗丹明、6-羧基-4’,5-二氯-2’,7’-二甲氧基荧光素琥珀酰亚胺酯、花菁3、花菁5或花菁5.5中的至少一种;
可选的,所述荧光淬灭基团为MGB。
6.权利要求1或2所述的同时检测BK病毒和JC病毒的引物组和/或权利要求3-5任一项所述的同时检测BK病毒和JC病毒的探针组在制备检测BK病毒、JC病毒或同时检测BK病毒和JC病毒的产品中的用途;
可选的,所述的产品包括检测试剂和试剂盒。
7.一种同时检测BK病毒和JC病毒的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于,包括权利要求1或2所述的同时检测BK病毒和JC病毒的引物组和/或权利要求3-5任一项所述的同时检测BK病毒和JC病毒的探针组;
可选的,所述上游引物BJ-F、下游引物BJ-R、探针BK-P和探针JC-P的摩尔比为1:1:0.5:0.5。
8.根据权利要求7所述的同时检测BK病毒和JC病毒的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于,还包括PCR master mix、阴性质控品、BKV DNA标准品和JCV DNA标准品中的至少一种;
可选的,所述阴性质控品为无菌水;
可选的,所述BKV标准品为克隆有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的重组质粒,设有6个浓度梯度,浓度依次为5×102 copies/uL、5×103copies/uL、5×104 copies/uL、5×105copies/uL、5×106 copies/uL、5×107copies/uL;
可选的,所述JCV标准品为克隆有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的重组质粒,设有6个浓度梯度,浓度依次为5×102 copies/uL、5×103copies/uL、5×104 copies/uL、5×105copies/uL、5×106 copies/uL、5×107copies/uL。
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