[发明专利]一种响应面法优化平枝栒子总黄酮的提取工艺

说明书

本发明涉及一种响应面法优化平枝栒子总黄酮的提取工艺，所述提取工艺包括有制备对照品溶液、制备样品溶液、测定检测波长、制作标准曲线、回归模型的建立与分析、实验结果分析与优化。采用本发明所述的提取工艺，具有提取工艺简单，提取效率较高，易于推广应用，应用响应面法优化确定最优因素，保证提取科学性、稳定性，为质量标准研究提供依据，其实用性强，并通过抗氧化活性测试，为平枝栒子的综合开发利用提供了理论基础和实验依据。

技术领域

本发明属于植物提取技术领域，具体地说是涉及一种响应面法优化平枝栒子总黄酮的提取工艺。

背景技术

平枝栒子( Cotoneaster horizontalis Decne.) 属于蔷薇目( Rosales) 蔷薇科( Rosaceae) 平枝栒子属( Co- toneaster) 。 平枝栒子分布于我国陕西、甘肃、湖北、湖南、四川、贵州、云南等地区，《中华本草》记载药材名为“水莲沙”，具有清热利湿，化痰止咳，止血止痛等功效，其叶、果实和果皮含右旋儿茶精(catechin)、左旋表儿茶精(epicatechin)等成分。

平枝栒子枝叶横展，叶小而稠密，花密集枝头，晚秋时叶色红色，红果累累，是布置岩石园、庭院、绿地和墙沿、角隅的优良材料。另外，还可作地被和制作盆景，果枝也可用于插花。根可药用。以枝叶或根入药。中药名为水莲沙。全年均可采，洗净，切片，晒干。叶、果实和果皮含右旋儿茶精(catechin)，矢车菊素(cyanidin)，花色素(anthocyanidin)等成分。性味酸、涩，凉。清热利湿，化痰止咳，止血止痛。主治痢疾，泄泻，腹痛，咳嗽，吐血，痛经，白带。

黄酮是基于2-苯基色原酮-4-酮（2-苯基-1-苯并吡喃-4-酮）骨架的黄酮类化合物。黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，具有抗炎、抗病毒、强心、镇静、镇痛、抗氧化、抗衰老和抗肿瘤等作用，其药用有效成分已经逐渐为人们所认识。目前，响应面曲线法优化平枝栒子中总黄酮提取工艺及其体外抗氧化性研究未见文献报道，为充分开发和利用平枝栒子，急需一种响应面法优化平枝栒子总黄酮的提取工艺。

发明内容

本发明为了解决现有技术中存在的问题，从而提供一种操作简单、易于工业化生产的提取工艺，以平枝栒子为原料，运用超声提取法在单因素实验的基础上，从乙醇浓度、液料比、提取时间、提取温度等因素对平枝栒子中总黄酮含量的影响，并通过多元二次回归方程来拟合响应面值与因素之间函数关系的一种优化平枝栒子中总黄酮的提取工艺，并对其体外抗氧化活性进行研究，并为平枝栒子的综合开发利用提供理论基础和实验依据，具体地说是一种响应面法优化平枝栒子总黄酮的提取工艺。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种响应面法优化平枝栒子总黄酮的提取工艺，所述提取工艺包括有制备对照品溶液、制备样品溶液、测定检测波长、制作标准曲线、回归模型的建立与分析、实验结果分析与优化，具体包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品51.90mg，置于烧杯中，加入乙醇溶液，于水浴锅上50～55℃溶解，定容至100mL容量瓶中，摇匀，得到0. 5190mg/mL的芦丁对照溶液；

(2)制备样品溶液：将平枝栒子粉碎，过20～40目筛，称取粗粉1.0g，置于具有瓶塞的锥形瓶中，加入乙醇溶液超声提取，冷却至室温，过滤，加乙醇溶液补足失去的重量，即得平枝栒子总黄酮提取液；

(3)测定检测波长：精密吸取平枝栒子总黄酮提取液5.0mL置于25mL容量瓶中，加入浓度为5%的NaNO₂溶液1.0mL，摇匀，放置10min，加入浓度为10%的Al(NO_３)_３溶液1.0mL，摇匀，放置10min，加入浓度为4%的NaOH溶液10.0mL，再用乙醇溶液稀释至刻度，静置15min，在200～800nm波长处每隔2nm测定一次吸光度；样品溶液在502nm处有最大吸收，即为测定波长；