[发明专利]一种宫颈癌诊断、预后判断试剂盒

说明书

本发明具体涉及一种宫颈癌诊断、预后判断试剂盒。宫颈癌目前仍是女性健康的一大威胁，现阶段，宫颈癌筛查方式是宫颈液基细胞学检查联合HPV病毒检测，但细胞学检测结果受人为主观影响较大，检测结果准确性不足。因此，提供更为准确的宫颈癌早期诊断技术具有重要的意义。基于上述现状，本发明通过筛查工作确认了MSC甲基化程度与宫颈癌发展状况呈正相关，基于该发现，本发明提供了一种用于宫颈癌早期筛查、诊断及预后情况判断的试剂盒，通过QMSP方式进行检测，显著提高了检测的灵敏度及特异性。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于宫颈癌早期筛查、诊断及预后情况判断的试剂盒。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

宫颈癌是女性第四大常见癌症，也是癌症导致女性死亡的第四大病因。根据国际癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer)发布的最新全球数据，2018年全球共有569847例宫颈癌新发病例，311365人死于宫颈癌。虽然HPV疫苗接种和早期宫颈癌筛查已成为预防该病的有效策略，但在中低收入国家中依然存在着该病较高的发病率和死亡率。尽管中国宫颈癌患者的生存率有了明显的提高，但相比于其他发达国家仍存在着一定的差距。

高危型人乳头瘤病毒HPV的持续感染，被认为是宫颈癌发生发展的主要原因。目前，临床上应用的宫颈癌筛查的主要方法是宫颈液基细胞学检查联合HPV病毒检测，但细胞学检测受到人为影响较大，漏诊几率较高，HPV检测特异性较低，存在过度治疗的局限性。近年来，随着对表观遗传学的研究，尤其是DNA甲基化检测技术的成熟，作为癌症发生的早期阶段，DNA甲基化检测逐步成为宫颈癌前病变检测的新兴诊断方法。大量甲基化基因如SOX1、PAX1、JAM3、EPB41L3、CADM1、MAL等也被认为是宫颈癌筛查的生物标志物。为了进一步提高宫颈癌的筛查效能，探索和开发更灵敏有效、更稳定便捷、更易应用于临床的分子标记物具有重要意义。

发明内容

针对上述研究进展和现有技术，发明人经过检索和查阅大量文献以及利用全基因组甲基化芯片对850k个甲基化位点进行筛选，并结合焦磷酸盐测序，最终筛选出一批在宫颈鳞癌中特异性高甲基化的基因。通过检测、验证和分析，本发明首次发现MSC基因随宫颈病变程度的加重，其DNA的甲基化程度逐渐升高，并且与宫颈癌分期密切相关，可以作为宫颈癌早期筛查的分子标记物。

基于上述研究成果，本发明提供以下技术方案：

本发明首先提供MSC基因作为宫颈癌诊断、预后和/或治疗标志物的应用。

所述MSC基因其核苷酸序列如下：

GCGGATTCTGGACTTGGGCGCCAACTCGTAGTCCACGCTCCCCGGGGTCAGCAGAGGGGCGCTCACGCTCTCGCCACCCACCTCGCTTTCTCACCCCGCGCTTCCCGGCCTGGGTTTTTAGTCTTCCTTGGAGCGCTCTCTGGCCTCCGCCTCCGCCAGGGAGCGGAAGGCGGAGACAGCGAGACTGGCCAGGGGGGAGGAAAGAGGACGCGTGTGGGCAAGGGGGACAACGGG(SEQ ID NO:1)。

依据本发明的研究结果，这些序列多位于CpG岛，基因组中绝大多数CpG岛位于启动子区、外显子区和第一内含子区。在肿瘤的发生过程中，启动子CpG岛胞嘧啶的异常高甲基化和整体基因的低甲基化导致整个基因的不稳定性和基因表达谱的改变，包括抑癌基因的失活、转录因子无法与DNA结合抑制转录等。依据本发明研究结论，MSC基因的甲基化程度与肿瘤发展情况呈正相关，特别是在宫颈癌中，MSC基因的甲基化率在宫颈癌不同发展时期具有显著的差异。