[发明专利]一种GAS5基因的实时荧光定量PCR检测试剂盒及应用在审
申请号: | 202011281377.0 | 申请日: | 2020-11-16 |
公开(公告)号: | CN112322748A | 公开(公告)日: | 2021-02-05 |
发明(设计)人: | 林爱福;桑凌杰;石成瑜 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12Q1/02;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 gas5 基因 实时 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 应用 | ||
1.一种GAS5基因的实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括GAS5基因检测引物、内参引物,
所述检测引物为GAS5 F#1+GAS5 R#1、GAS5 F#2+GAS5 R#2或GAS5 F#3+GAS5 R#3中的一组或三组:
GAS5 F#1:5’-ATGGTGGAGTCCAACTTGCC-3’;
GAS5 R#1:5’-AGGATAACAGGTCTGCCTGC-3’;
GAS5 F#2:5’-GGACAGTTGTGTCCCCAAGG-3’;
GAS5 R#2:5’-CAAGCCGACTCTCCATACCT-3’;
GAS5 F#3:5’-TGAAGACAGTTCCTGTCATACCTT-3’;
GAS5 R#3:5’-GCATGCTTGCTTGTTGTGGT-3’;
内参引物B2M F:5’-AGA TGA GTA TGC CTG CCG TG-3’;B2M R:5’-TCA TCC AAT CCAAAT GCG GC-3’。
2.如权利要求1所述试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包括实时荧光定量PCR反应液。
3.如权利要求2所述试剂盒,其特征在于所述反应液包含PCR扩增酶,盐溶液,SYBR-dNTP,待测样品的cDNA。
4.一种权利要求1所述GAS5基因的实时荧光定量PCR检测试剂盒在检测细胞生长活力中的应用。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述应用的方法为:以待测细胞样品的基因组cDNA为模板,在GAS5基因检测引物或内参引物的作用下,进行RT-qPCR反应,以正常样品为对照组,按照2^(ΔΔCq)计算相对丰度,若统计学显著,p0.05且GAS5丰度低于正常对照组,则待测细胞样品的细胞活力高于对照组;若统计学显著,p0.05且GAS5丰度高于正常对照组,则待测细胞样品的细胞活力低于对照组。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述待测细胞包括人胚胎肾细胞293T。
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