[发明专利]筛选靶细胞的方法、试剂盒及其用途

说明书

本发明提供了一种筛选靶细胞的方法，所述靶细胞适于分泌目标分子，其包括：在适于分泌目标分子的条件下，在培养腔室中，对所述候选单细胞进行培养，其中，所述培养腔室中设置有信号筛选层，所述信号筛选层覆盖所述单细胞，所述信号筛选层含有特异性识别所述目标分子的信号分子；和基于所述信号筛选层中所述信号分子的信号，选择适于分泌所述目标分子的靶细胞。利用该方法能够有效筛选分泌目标分子的靶细胞。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体的，本发明涉及筛选靶细胞的方法、试剂盒及其用途，更具体的，本发明涉及一种筛选靶细胞的方法，一种试剂盒，一种制备抗体的方法，一种筛选单克隆抗体的方法，一种单克隆抗体，一种抗体-抗原复合物，一种筛选抗体的方法。

背景技术

有限稀释法是一种常用的克隆方法，是指将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数，计出1mL的细胞数。常用来筛选融合的动物细胞。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

然而，目前筛选表达目标分子的细胞的方法，尤其是筛选能够单克隆抗体的融合细胞的方法仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提供了一种能够有效表达。

在本发明的一个方面，本发明提出了一种筛选靶细胞的方法，所述靶细胞适于分泌目标分子，其特征在于，包括：在适于分泌目标分子的条件下，在培养腔室中，对所述候选单细胞进行培养，其中，所述培养腔室中设置有信号筛选层，所述信号筛选层覆盖所述单细胞，所述信号筛选层含有特异性识别所述目标分子的信号分子；和基于所述信号筛选层中所述信号分子的信号，选择适于分泌所述目标分子的靶细胞。利用该方法，由于在培养腔室中，仅存在单细胞，因此，在培养过程中，如果该单细胞能够分泌目标分子，则目标分子可以被信号分子特异性捕获，由此，可以使得信号分子在特定范围内发生聚集，从而信号分子的信号可以被放大，由此，通过检测信号分子的信号差异，可以确定该单细胞能否表达目标分子。该方法与现有的有限稀释法相比要快速、节省成本、提高效率，并且能够实现高通量筛选。

在本发明的第二方面，本发明提了一种试剂盒，根据本发明的实施例，其包括：水凝胶；信号分子；和生物培养芯片。利用该试剂盒，可以有效地实施前面所述的方法，从而实现前面所描述的效果，另外前面针对方法所描述的特征同样适用该试剂盒，在此不再赘述。

本发明还提出了一种制备抗体的方法，根据本发明的实施例，其包括：利用前面所述的方法，筛选目标细胞；使所述目标细胞进行扩增和表达抗体。由此，可以有效地获得能够表达单克隆抗体的融合细胞。

本发明还提出了一种筛选单克隆抗体的方法，根据本发明的实施例，其包括：将多个杂交瘤细胞分配在所述生物培养芯片上，其中，每个所述腔室中每个所述培养腔室中含有至多一个所述杂交瘤细胞；根据前面所述的方法，选择阳性杂交瘤细胞；分离所述阳性杂交瘤细胞；对所述阳性杂交瘤细胞进行培养和抗体表达，以便获得单克隆抗体。如前所述，利用本发明的方法，能够有效地获得表达单克隆抗体的融合细胞，从而进一步可以获得单克隆抗体。

本发明还提出了一种一种单克隆抗体，其是通过前面所述的方法获得的。

本发明还提出了一种抗体-抗原复合物，所述抗体为前面所述的单克隆抗体，所述单克隆抗体上连接有信号分子。利用该抗体-抗原复合物能够有效地获得配对抗体，即和已知单克隆抗体具有不同抗原决定簇的抗体。