[发明专利]一种柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法及应用

权利要求书

1.一种柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，包括：

S1，丙烯酰胺和双丙烯酰胺在四甲基乙二胺和过硫酸铵的作用下，聚合形成一定基质刚度的聚丙烯酰胺凝胶，所述基质刚度模拟自生物组织的刚度；

S2，在所述聚丙烯酰胺凝胶上孵育微环境物质，用于模拟细胞所处的微环境；

S3，在所述聚丙烯酰胺凝胶界面上接种宿主细胞，加入互作的细菌建立细胞细菌互作模型。

2.根据权利要求1所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述一定基质刚度的聚丙烯酰胺凝胶包括单一基质刚度的聚丙烯酰胺凝胶和不同刚度变化的聚丙烯酰胺凝胶。

3.根据权利要求1所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述S2之后还包括：在所述聚丙烯酰胺凝胶表面装载荧光粒子，所述荧光粒子的直径范围为200～500nm。

4.根据权利要求1所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述丙烯酰胺的浓度范围为10％～20％，所述双丙烯酰胺的浓度范围为0.2％～6％。

5.根据权利要求4所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述聚丙烯酰胺凝胶基质刚度的范围为0～150kPa。

6.根据权利要求1所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述S3之前还包括：在所述聚丙烯酰胺凝胶表面建立不同的微图案。

7.根据权利要求1所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述S3之后还包括：通过流式细胞术检测被感染的细胞数以及通过平板计数法检测细菌入侵的总量。

8.根据权利要求1所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法，其特征在于，所述S3之后还包括：采用共聚焦激光扫描显成像确定细胞形态和牵引力显微镜分析法测定细胞牵引力。

9.一种根据权利要求1～8任一所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法得到的柔性基底的细胞细菌互作模型在确定细胞细菌互作与细胞外基质刚度之间的调控关系的应用。

10.一种根据权利要求1～8任一所述的柔性基底的细胞细菌互作模型的制备方法得到的柔性基底的细胞细菌互作模型在抗菌药物治疗胞内细菌感染药效的检测方法的应用。