[发明专利]一种利用有害蓝藻大规模快速培养草履虫的方法

说明书

本发明公开了一种利用有害蓝藻大规模快速培养草履虫的方法。该方法将有害群体蓝藻进行富集、干燥和研磨获得单细胞和小群体的蓝藻藻粉，再将其用于草履虫的培养中。本发明不仅缓解了草履虫对群体藻的摄食障碍，在短时间内获得高密度的草履虫种群，同时降低草履虫大规模培养中饵料成本和对水质的污染，避免了复杂的饵料配比环节，藻粉也更适合长期保存。并且，通过草履虫对有害蓝藻的摄食和消化，将有害蓝藻进行有益转化，从而消除富营养化水体中有害蓝藻打捞收集上岸后续处置的环境危害，具有重要的现实意义。本发明中培养草履虫的有机碳源为有害群体蓝藻，该原材料在富营养化水体中常见且易获得。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用有害蓝藻大规模快速培养草履虫的方法。

背景技术

草履虫是水体中常见的一种浮游原生动物，它们细胞结构简单且繁殖快，以浮游植物、细菌及一些有机碎屑等为食，是水生动物主要的食物资源，常作为一种天然饵料用于水生经济物种幼苗和观赏鱼类的培育，同时由于草履虫可以有机碎屑为食，也可以起到净化水质的作用。在科学研究中，草履虫具有易培养易观察的特征，也常被作为重要物种用于科学实验，如遗传学实验和水质监测等。因此，大规模快速培养草履虫是在其作为天然饵料和作为科学研究材料中的一项关键技术。

目前，在草履虫的常规培养中通常采用的有机碳源主要有稻草浸出液、细菌、牛肉汁、麦粒培养液、大米培养液、鲜奶、蛋白胨培养液等，尽管这些培养液材料能够在短时间内培育出高密度的草履虫，但其成本较高、易变质而影响水质，且不易控制其添加比例，因而不适宜于草履虫的长期大规模培养。此外，由于湖水中有机质有限，采用煮沸处理的湖水培养而获得的草履虫丰度较低，也不能满足短时间内获得高密度草履虫的需求。微藻是草履虫的天然饵料，而目前尚未见采用有害蓝藻大规模培养草履虫的技术公开。有害蓝藻大量增殖形成藻华，通常以群体形态存在，微型植食性水生动物受限于摄食方式及自身个体小等因素限制，对群体形态微囊藻的摄食效率相对较低，从而无法高效地转化利用这些有害蓝藻。常见的有害蓝藻治理方法主要包括喷洒化学试剂和机械操作等使藻细胞裂解失活。

发明内容

为解决上述现有技术存在的缺陷，本发明提供一种利用有害蓝藻大规模快速培养草履虫的方法。

本发明的目的是提供一种利用有害蓝藻大规模快速培养草履虫的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1）将收集的高密度有害群体蓝藻进行裂解处理，所述的裂解处理的步骤如下：先将收集的含有有害群体蓝藻的藻液经4000-5000rpm离心10-20min获得藻泥；再将藻泥放置于50~65°C烘箱中进行干燥处理24~48小时；然后将干燥后的藻泥进行研磨，研磨后过孔径为40μm的筛网，获得藻粉；

（2）将藻粉加至低密度草履虫培养液中，藻粉的浓度为0.1-1mg/mL，所述草履虫的初始接种量不少于10 ind/mL，于20~30℃的温度进行培养，培养过程中每24小时添加一次藻粉使培养液中藻粉的浓度不低于0.1mg/mL；

（3）在培养基中的草履虫培养4-7日后或草履虫浓度达到环境容纳量时，可将草履虫富集后收集或将草履虫添加至新鲜培养基中培养。

所述用于接种的草履虫的制备如下：先采集草履虫，分离获得纯种草履虫；向培养瓶中加入培养液和由有害群体蓝藻经裂解处理后的藻粉，所述培养液为稀释10-30倍的浮游生物专用培养基，藻粉的添加量为5 mg/mL，接种获得的纯种草履虫后于50 mL培养液中进行培养，直到草履虫密度达到300 ind/mL时，直接作为种源使用。

所述的草履虫为多小核草履虫Paramecium multimicronucleatum、大草履虫Paramecium caudatum中的一种或两种混合。

所述草履虫的初始接种量10-30ind/mL。