[发明专利]一种从Nigella sativa种籽中分离提取酚苷类化合物的方法

说明书

本发明涉及一种从Nigella sativa种籽中分离提取酚苷类化合物的方法：以干燥Nigella sativa种籽粉碎后用石油醚脱脂，用60‑80%乙醇提取，减压回收溶剂，得到提取物浸膏；2）提取物浸膏用甲醇溶解，拌样于硅胶柱，二氯甲烷‑甲醇梯度洗脱，得到7个组分Fr1‑Fr7；3）第4个组分Fr4经硅胶柱色谱分离，得到5个组分4‑1~4‑5；4）组分4‑3经凝胶柱色谱、硅胶柱色谱分离，得到3，5二羟基苯乙醇‑3‑O‑β‑吡喃糖苷；组分4‑2经反相柱色谱、Sephadex LH‑20葡聚糖凝胶柱色谱分离，得到阔苞菊苷C。本发明提取工艺简单，产物易得，溶剂可回收利用，提取量大，可工业化生产。

技术领域

本发明属于植物提取分离技术领域，具体涉及一种从Nigella sativa种籽中有效、快速地分离提取酚苷类化合物(如3，5二羟基苯乙醇-3-O-β-吡喃糖苷、阔苞菊苷C等)的方法。

背景技术

Nigella sativa种籽为毛茛科黑种草属植物Nigella sativa干燥的种籽，原产于西南亚，广泛分布在地中海、中欧、西亚等地；其种籽油作为食用油在中东和北非国家等如埃及地区被广泛使用，同时，也用于保健食品对抗疾病，在食品中应用广泛。Nigellasativa种籽的主要成分有黄酮、皂苷、生物碱、甾体和酚类等，此外还含有大量油脂。Nigella sativa种籽具有多种药理作用，包括抗菌、抗氧化、抗癌、抗炎、降糖、保肝、利尿等。

目前，尚未关于从Nigella sativa种籽中分离提取酚苷类化合物(如3，5二羟基苯乙醇-3-O-β-吡喃糖苷、阔苞菊苷C等)的报道。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种从Nigella sativa种籽中简单、有效、快速地分离提取酚苷类化合物(3，5二羟基苯乙醇-3-O-β-吡喃糖苷和阔苞菊苷C)的方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种从Nigella sativa种籽中分离提取酚苷类化合物的方法，其包括以下步骤：

1)以干燥的Nigella sativa种籽为原料，粉碎后用石油醚脱脂，残渣挥干石油醚，用60-80％乙醇提取，提取液减压回收溶剂，得到提取物浸膏；

2)将提取物浸膏用甲醇溶解，拌样于硅胶柱，用体积比为20:1、15:1、10:1、5:1、3:1、1:1的二氯甲烷-甲醇对硅胶柱进行梯度洗脱，硅胶薄层色谱检测合并，得到7个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr1-Fr7；

3)第4个组分Fr4经硅胶柱色谱分离，以体积比为30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1的二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，硅胶薄层色谱检测合并，得到5个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为4-1～4-5；

4)组分4-3经凝胶柱色谱、硅胶柱色谱分离，得到化合物3，5二羟基苯乙醇-3-O-β-吡喃糖苷粗品；组分4-2经反相柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱分离，得到阔苞菊苷C粗品。

具体的，步骤1)中，石油醚脱脂2-4次，每次脱脂时间为2-4天，干燥Nigellasativa种籽与石油醚的料液添加比为5kg：6-10L。

进一步的，步骤1)中，用70％乙醇冷浸提取3次，每次3天；残渣与70％乙醇的料液添加比为5kg：6-10L。

具体的，步骤4)中，组分4-3经凝胶柱色谱分离时用甲醇洗脱，经硅胶柱色谱分离时，以体积比为15:1、10:1、5:1、1:1的乙酸乙酯-甲醇进行梯度洗脱。