[发明专利]一种抗原抗体混合检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抗原抗体混合检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法。所述试剂盒包括盒体、位于所述盒体内的粘贴支架，所述粘贴支架上延长度方向依次粘贴有样本垫、金标垫、NC膜、吸样垫，所述NC膜上设有抗体检测线、抗原检测线和质控线，所述金标垫含有金标S抗体和金标S、N蛋白；所述抗体检测线上包被有S抗体，所述抗原检测线上包被有S蛋白和N蛋白混合物，所述质控线上包被有鼠抗6×His单抗。该产品为更快捷、更准确、更早期、更便利检测新冠病毒提供更多工具，为全球抗击疫情的战役提供交叉科学的武器。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抗原抗体混合检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法。

背景技术

新型冠状病毒(2019-nCoV)感染后常见体征有发热、干咳、乏力、逐渐出现呼吸困难，而部分患者未表现出临床症状。潜伏期及无症状感染者均具有传染性，且具备人传人的特点，而无症状感染者也可成为传染源，其主要通过呼吸道飞沫和密切接触传染传播，人群普遍易感。

新型冠状病毒(2019-nCoV)目前临床诊断是通过实时定量荧光PCR核酸检测试剂(核酸检测)检测患者和疑似患者血液中的2019-nCoV特定核酸序列，虽然该方法在排查中发挥了重要作用，但是该方法受操作繁琐、耗时长、需要集中送检、对检测人员要求高等的限制，同时检测结果受RNA提取效果影响较大，假阴性较高。该方法检测结果还会受到PCR试剂的质量和气溶胶污染的影响。市场上检测试剂盒目前为抗体检测试剂盒，其仅在发病产生抗体(感染8-15天) 后才能检出，不能在感染早期检测出来，因此还不能满足大规模疑似患者和无症状感染者的快速筛查。

如何在机场这种人流量很大的场所快速筛查疑似病例，供临床医生快速判断是否为新型冠状病毒肺炎，以便于快速隔离免于传染给更多的人，是亟需解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是快速检测新型冠状病毒，在感染3-5天就可检出，检出率可达80％；实现更早期、更便捷、更准确、更快捷检出新型冠状病毒，提供一种快速、简单、可靠、成本低廉、灵敏度高的抗原抗体混合检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒。

本发明的另一个目的是提供一种抗原抗体混合检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒的制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种抗原抗体混合检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒，包括盒体、位于所述盒体内的粘贴支架，所述粘贴支架上延长度方向依次粘贴有样本垫、金标垫、 NC膜、吸样垫，所述NC膜上靠近所述金标垫侧设有抗体检测线(X)和抗原检测线(I)，所述NC膜上靠近所述吸样垫侧设有质控线(C)，所述金标垫含有金标S抗体和金标S、N蛋白，所述金标S抗体和金标S、N蛋白为由胶体金标记的含有6×His标记的新型冠状病毒S抗体和由胶体金标记的含有6×His标记的 S、N蛋白；所述抗体检测线上包被有S抗体，所述抗原检测线上包被有S、N蛋白，所述质控线上包被有鼠抗6×His单抗。

作为本发明的进一步改进，所述金标S抗体和金标S、N蛋白的制备方法包括以下步骤：

S11、胶体金制备：取2mL 1wt％氯金酸加入120mL水溶液中，加热至沸腾，再加入2-5mL 1wt％柠檬酸三钠混匀，煮沸待胶体金溶液颜色由蓝经紫变紫红后，冷却；

S12、金标液制备：取1mL胶体金加入100μL0.1M、pH7.2的PB，混匀后加入0.1MNaOH溶液调节pH值至7.2-7.6，加入15-25μg含有6X His标记的新型冠状病毒S、N蛋白充分混匀，再加入100μL 10vol％的牛血清白蛋白混匀；加入 15-25μg含有6×His标记的新型冠状病毒S抗体充分混匀，再加入100μL 10vol％的牛血清白蛋白混匀；

S13、金标液纯化：将金标液离心后弃去上清，加入含有20wt％蔗糖的金标复溶液溶解，即得。