[发明专利]一种从Nigella sativa种籽中提取乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖的方法

说明书

本发明涉及一种从Nigella sativa种籽中提取分离化合物乙基‑α‑D‑呋喃阿拉伯糖的方法：选取干燥的Nigella sativa种籽为原料，粉碎经石油醚脱脂后，用乙醇在室温下提取，提取物浸膏加甲醇溶解后，用硅胶拌样后上样，用二氯甲烷与甲醇洗脱，得到Fr1‑Fr7七个组分，再经过不断地分离纯化，得到化合物纯品。本发明方法有利于更好地开发利用Nigella sativa这一药用植物，有利于植物的可持续利用；本发明提取工艺简单，易得到乙基‑α‑D‑呋喃阿拉伯糖化合物单体，溶剂可回收利用，提取量大，可工业化生产。

技术领域

本发明属于植物提取分离技术领域，具体涉及一种从Nigella sativa种籽中有效、快速地提取分离化合物乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖的方法。

背景技术

Nigella sativa种籽为毛茛科黑种草属植物Nigella sativa干燥的种籽，原产于西南亚，广泛分布在地中海、中欧、西亚等地；其种籽油作为食用油在中东和北非国家等如埃及地区被广泛使用，同时，也用于保健食品对抗疾病，在食品中应用广泛。Nigellasativa种籽的主要成分有黄酮、皂苷、生物碱、甾体和酚类等，此外还含有大量油脂。Nigella sativa种籽具有多种药理作用，包括抗菌、抗氧化、抗癌、抗炎、降糖、保肝、利尿等。

目前，尚无关于在Nigella sativa种籽中提取分离化合物乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖的报道。而本发明则通过对Nigella sativa种籽乙醇提取物的分离，经过硅胶柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱等分离手段，将Nigella sativa种籽中所含的乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖快速、有效的提取分离出来。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种从Nigella sativa种籽中简单、有效、快速分离纯化得到化合物乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖的方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种从Nigella sativa种籽中提取乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖的方法，其包括以下步骤：

1)以干燥的Nigella sativa种籽为原料，粉碎后用石油醚脱脂，残渣挥干石油醚，用60-80％乙醇提取，提取液减压回收溶剂，得到提取物浸膏；

2)将提取物浸膏用甲醇溶解，拌样于硅胶柱，用体积比为20:1、15:1、10:1、5:1、3:1、1:1的二氯甲烷-甲醇对硅胶柱进行梯度洗脱，硅胶薄层色谱检测合并，得到7个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr1-Fr7；

3)将组分2经反相柱色谱分离，以体积比20:80、40:60、60:40、80:20、100:0的甲醇-水溶液梯度洗脱，硅胶薄层色谱检测合并，得到6个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为2-1～2-6；

4)组分2-5经Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱，以体积比1:1的二氯甲烷-甲醇进行洗脱，再经硅胶柱色谱分离，以体积比为20:1、15:1、10:1、5:1、1:1的二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，得到乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖粗品。

进一步的，为了获得较高的纯度，可以将步骤4)中所得乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖粗品用甲醇溶解，经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，以甲醇洗脱，得乙基-α-D-呋喃阿拉伯糖纯品。

具体的，步骤1)中，石油醚脱脂2-4次，每次脱脂时间为2-4天，干燥Nigellasativa种籽与石油醚的料液添加比为5kg：6-10L。

具体的，步骤1)中，用70％乙醇冷浸提取3次，每次3天；残渣与70％乙醇的料液添加比为5kg：6-10L。