[发明专利]一种流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法在审

专利信息
申请号: 202011310369.4 申请日: 2020-11-20
公开(公告)号: CN113151581A 公开(公告)日: 2021-07-23
发明(设计)人: 钱晓华;廖夏;陈道湧;赵戴君;于晓南;杨吉星;张静;刘恬恬 申请(专利权)人: 上海市虹口区疾病预防控制中心
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
代理公司: 上海宣宜专利代理事务所(普通合伙) 31288 代理人: 刘洁瑜
地址: 200000 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 流感 h3n2 手足 cva6 lamp 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤A:设计流感H3N2、手足口病毒CVA6的LAMP引物组;

步骤B:筛选流感H3N2、手足口病毒CVA6的有效LAMP引物组;

步骤C:采用多样本评估有效LAMP引物组,进行LAMP检测实验。

2.根据权利要求1所述的流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法,其特征在于,在所述步骤A中,利用LAMP引物设计软件设计出多组流感H3N2、手足口病毒CVA6的LAMP引物组。

3.根据权利要求1所述的流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法,其特征在于,在所述步骤B中,包括:

流程一:将样本从RNA样本逆转录成cDNA样本;

流程二:用多组LAMP引物组对多份样本进行LAMP试验;

流程三:对流程二中的产物进行电泳检测;

流程四:根据流程三中的电泳检测实验结果,筛选出有效的LAMP引物组。

4.根据权利要求3所述的流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法,其特征在于,所述流程二具体为,制备反应体系,每个样本使用各引物组中的内引物、外引物以及环引物3种引物共6条,每个反应管分别加入5ul样本以及阳性对照样本、阴性对照样本置于不同的反应管中,再将反应管置于LAMP扩增仪中,在65℃条件下进行反应60min,反应结束后拍照记录图像。

5.根据权利要求3所述的流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法,其特征在于,所述流程三具体为,使用1.5%的琼脂糖凝胶对LAMP扩增仪扩增的产物进行电泳检测,实验条件为120V,35min,之后在凝胶成像仪中照射紫外拍照。

6.根据权利要求1所述的流感H3N2和手足口病CVA6的LAMP检测方法,其特征在于,在所述步骤C中,将多个流感H3N2、手足口病毒CVA6的样本分别用有效LAMP引物组进行RT-LAMP检测,将肉眼观察的检测结果与LAMP仪器的测试结果进行比较,多样本评估有效LAMP引物组的阳性检出率。

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