[发明专利]CrePR1-P2A与CrePR1-IERS2质粒构建效率的比较方法在审
| 申请号： | 202011311169.0 | 申请日： | 2020-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN112391411A | 公开（公告）日： | 2021-02-23 |
| 发明（设计）人： | 林锴珺 | 申请（专利权）人： | 林锴珺 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85 |
| 代理公司： | 深圳新创友知识产权代理有限公司 44223 | 代理人： | 江耀纯 |
| 地址： | 364102 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | crepr1 p2a iers2 质粒 构建 效率 比较 方法 | ||
【权利要求书】：
1.CrePR1-P2A与CrePR1-IERS2质粒构建效率的比较方法，其特征在于：
在细胞系NIH3T3中转染mROSA-LSL-EGFP质粒，并且同时转染LScKO-SG-CrePR1-IERS2-tdtomato或LScKO-SG-CrePR1-P2A-tdtomato，在RU486米非司酮诱导下激活PR1孕激素受体，即可激活转染有两个质粒的细胞内mTmG体系，从而可以进行P2A与IERS2的体系比较。
2.根据权利要求1所述的CrePR1-P2A与CrePR1-IERS2质粒构建效率的比较方法，其特征在于：所述的转染成功的细胞在溶解有2.33umol/ml RU486药物米非司酮的二甲亚砜中激活PR1孕激素受体。
3.根据权利要求1所述的CrePR1-P2A与CrePR1-IERS2质粒构建效率的比较方法，其特征在于：进行P2A与IERS2的体系比较后，决定在构建转基因的蛋白连接域中连接哪一个连接域。
4.根据权利要求1所述的CrePR1-P2A与CrePR1-IERS2质粒构建效率的比较方法，其特征在于：通过用膜蛋白中表达mT的新生鼠即mTmG小鼠来分表皮，建立mTmG纤维细胞。
5.根据权利要求1所述的CrePR1-P2A与CrePR1-IERS2质粒构建效率的比较方法，其特征在于：所述细胞系NIH3T3在传代之后转染质粒。
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