[发明专利]一种前列腺素E2的高收率分离纯化方法

说明书

本发明提供了一种高收率分离纯化前列腺素E2的方法，包括以下步骤，将前列腺素粗品进行溶解、过滤；将上述过滤后的溶液上样到装有均粒反相硅胶的层析柱中进行层析；采用乙酸水溶液和有机溶剂作为流动相对目标产物进行洗脱；分段收集目的峰值的溶液，对符合要求的组份液进行汇总。本发明采用单分散的UniSil C18或UniSil C8作为固定相，分离方法简单，可规模化生产，回收率高且稳定。

技术领域

本发明涉及药物纯化领域，特别是一种高收率分离纯化前列腺素E2的方法。

背景技术

前列腺素E2，也称地诺前列酮，英文名称简写为PGE2，前列腺素E2(PGE2)是一种重要的细胞生长和调节因子，是花生四烯酸环氧合酶代谢产物，为二十碳不饱和脂肪酸。PGE2可引起强烈子宫收缩，影响胎盘血液供应和胎盘功能，而发生流产。收缩子宫平滑肌的机制，可能与前列腺素使子宫平滑肌细胞内游离钙释放增加有关。PGE2不同于催产素，它对各期妊娠子宫均有兴奋作用，且比较温和，其缩宫作用较PGE2α强10～40倍。PGE2对子宫颈有转化及扩张作用，可用于人流手术前扩张宫颈。这可能是由于前列腺素刺激宫颈纤维细胞，是胶原纤维排列改变所致。PGE2可使支气管平滑肌舒张，对下丘脑体温调节中枢有升温作用，用药后体温可升高1～2℃。

前列腺素E2英文名称：prostaglandin E2；PGE2；Cerviprost；(Z)-7-((1R，2R，3R)-3-Hydroxy-2-((S，E)-3-hydroxyoct-l-en-l-yl)-5-oxocyclopentyl)hept-5-enoicacid；ProstaglandinE2；prostin；Prostaglandin E2；Propess；Prepidil；MCH(human，mouse，rat)；Cervidil；prostine2；l-pge2；Prostenon；Cervidil(R)

化学结构式如下：

目前国内外专利、科研文献等对前列腺素E2的报道多为生产方法及产品应用专利，分离纯化方法鲜有报道。CN111394289A主要是基因工程生产方法，其获得的样品纯度极低，仅2.547％，远远不能达到合格标准。因此有必要对前列腺素E2的分离、纯化和制备做更进一步的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高收率分离纯化前列腺素E2的方法，仅需一步层析纯化即可满足前列腺素E2纯度大于98.5％、收率大于99％的要求，纯化收率高而稳定，同时本发明分离方法简单方便，可用于规模化生产，大大降低生产成本。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：一种前列腺素E2的高收率分离纯化方法，包括以下步骤：1)将前列腺素E2粗提取物溶解并过滤；2)将上述过滤后的前列腺素E2溶液上样到装有反相硅胶微球的层析柱中进行层析；3)采用酸性水溶液和有机溶剂作为流动相对前列腺素E2溶液进行梯度洗脱；4)分段收集目的峰值的前列腺素E2溶液，对符合要求的组份液进行汇总；

所述前列腺素E2的高收率分离纯化方法，洗脱液中前列腺素E2的纯度大于98.5％，收率大于99％。

优选的，所述反相硅胶为单分散的、具有孔道结构的微球。

优选的，所述反相硅胶微球的型号是UniSil C18或UniSil C8。

优选的，所述1)中前列腺素E2粗提取物溶解于酸性溶液中。

优选的，所述3)中酸性水溶液为乙酸水溶液。

优选的，所述3)中有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇。

优选的，上样前，对层析柱进行平衡，先用高浓度所述有机溶剂进行再生，后用浓度低于30％的所述有机溶剂进行平衡。所述高浓度指浓度在30％-70％之间。