[发明专利]AMHR2重组蛋白或融合蛋白在制备AMH信号轴异常活化相关疾病治疗药物中的用途

说明书

本发明涉及AMHR2重组蛋白或融合蛋白在制备AMH信号轴异常活化相关疾病治疗药物中的用途，尤其是在制备AMH中和剂或拮抗剂中的用途。通过稳定性实验，本发明中的AMHR2融合蛋白半衰期长，体内稳定性优异，且与AMH结合力强，具备一定的成药性。通过细胞实验以及动物模型实验，本发明提供的AMHR2重组蛋白或AMHR2融合蛋白在体内外均能有效拮抗或中和AMH，并能进一步阻断AMH信号轴，能够有效预防和治疗AMH信号轴异常活化引起的病症。

技术领域

本发明涉及生物医药工程技术领域，具体涉及重组AMHR2及AMHR2融合蛋白、以其作为活性组分的药物组合物和其医药用途，尤其是用于AMH信号轴异常活化相关疾病的用途。

背景技术

抗苗勒管激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)，亦称为苗勒管-抑制物质(Müllerian Inhibiting Substance,MIS)，是一种TGF-β家族糖蛋白。AMH受体包括I型受体和II型受体的受体复合物，其中II型受体即AMHR2，多个I型受体参与信号的传导。AMH在人雄性胚胎中诱导苗勒管退化，但在生殖年龄的女性中表达，不随周期或妊娠而波动，随卵母细胞数量和质量二者降低而逐渐降低，表明AMH可用作卵巢生理学的标记物。参见文献例如[Zec et al，(2011)BiochemiaMedica 21(3)：219-30]。

在睾丸中，AMH通过抑制细胞色素P45017α-羟化酶/C17-20裂解酶和芳香化酶的转录来调节Leydig细胞雄激素的生成，染色体19p13位置的AMH突变或染色体12q13位置的AMHR2突变均可以引起男性常染色体隐性遗传疾病：持续性苗勒氏管综合征(Persistent Müllerian duct syndrom，PMDS)。对于女性而言，出生后AMH是由颗粒细胞产生并逐渐升高，在生育期达到高峰，与生育力的峰值吻合，然后在功能性绝经时逐渐下降。在卵巢中，AMH抑制原始卵泡募集、第二次减数分裂、颗粒细胞分裂和孕激素产生。

正由于血液AMH水平与生育力的吻合性，其作为生物标志物已广泛应用于生育力的诊断。近年来的一些报道显示，AMH参与多种生理过程，如怀孕，排卵，更年期和生育力保留等。它还可能参与一些特殊疾病的病理生理过程，如多囊卵巢综合征(polycysticovarian syndrome，PCOS)和癌症等，但由于这些疾病的复杂性，AMH信号轴在其中的地位未明。目前，尚未有AMH信号轴的拮抗剂功能的新型药物问世，阻碍了进一步的研究。

因此，本发明人创新性的认为，利用通用的蛋白质工程方法，重组AMHR2的胞外结构域获得的重组蛋白，以及再进一步制备AMHR2获得的融合蛋白，也许可以发挥AMH拮抗剂的效应。

专利文献WO2015114142A1公开了一种类似的AMHR融合蛋白、其制备方法及其在检测血浆AMH水平中的用途。但并未公开或提示其拮抗/中和AMH作用，事实上，AMH和AMHR2介导的信号传导是由多个受体(如多个ALK受体)、多个接头蛋白参与的，重组AMHR2及AMHR2融合蛋白能否发挥拮抗效果是未知的，即重组蛋白和融合蛋白能否阻断AMH信号轴、能否拮抗/中和由AMH介导的生物学效应是未知的。进一步的，重组蛋白和融合蛋白能否用于机理尚未明确的疾病治疗也是完全未知的，需要技术人员进行大量创造性的工作才能得知。

发明内容

本发明的目的在于，依托上述研究背景，研究AMHR2重组蛋白或AMHR2融合蛋白能否用于AMH的拮抗或中和、AMH异常相关疾病的治疗，并对发挥所述用途的AMHR2重组蛋白或AMHR2融合蛋白的具体结构、制备方法和用途进行了限定性描述，即提供了AMHR2重组蛋白或AMHR2融合蛋白、其制备方法和用途。

本发明的第一方面，对AMHR2重组蛋白或AMHR2融合蛋白的多肽链结构进行描述。AMHR2重组蛋白的多肽链结构通式为Z1，AMHR2融合蛋白的多肽链结构通式为Z1-Z2，其中Z1为AMHR2胞外结构域或其功能变体或片段，Z2为二聚化结构域或其功能变体或片段。