[发明专利]一种丽格海棠组培快速繁殖方法

说明书

本发明属于植物组织培养技术领域，具体地说，涉及一种丽格海棠组培快速繁殖方法；本发明以丽格海棠单芽顶端为外植体，经过外植体消毒、芽初代诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽等步骤建立了丽格海棠组织培养快繁技术体系，从而实现丽格海棠快速繁殖的目的，本发明所采用的低温诱导和继代培养，降低了培养苗体的玻璃化和褐化的风险，本发明广泛应用于海棠组织培养快速繁殖技术领域。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体地说，涉及一种丽格海棠组培快速繁殖方法。

背景技术

丽格海棠为葫芦目、秋海棠属、秋海棠科属草本植物。丽格海棠为须根系，株形丰满，单叶互生，不对称心形，叶色多翠绿，少有红棕色。

花形多样，多为重瓣，花色丰富，有红、橙、黄、白等，花朵硕大、色彩艳丽，具有独特的姿、色、香；而且花期长，可从12月持续至翌春4月。盛花期为4至6月和9至12月。性喜温暖、湿润、半荫环境。分布于热带及亚热带地区。宜做观赏物种。由于种源缺乏、扦插难生根以及遗传变异等诸多因素，丽格海棠通过常规繁殖方法难以在短期内获得批量苗木供推广应用。

发明内容

本发明克服了现有技术存在的不足，提供了一种丽格海棠组培快速繁殖方法，以丽格海棠单芽顶端为外植体，经过外植体消毒、芽初代诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽等步骤建立了丽格海棠组织培养快繁技术体系，从而实现丽格海棠快速繁殖的目的。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种丽格海棠组培快速繁殖方法，包括以下步骤：

1）外植体处理及消毒：选取健壮丽格海棠植株新芽顶端作为外植体，先用去污粉水浸泡清洗5～10min，然后用流水下冲洗1～3h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒5～30s后用无菌水洗3～5次，再用0.2%升汞溶液消毒5～15min，用无菌水冲洗4～6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用；

2）诱导培养：将步骤1中处理后的丽格海棠外植体，切成0.5-1cm的小段接种到诱导培养基上，在18-25℃，光照12-14h，光照强度为1400lx条件下培养，至诱导形成丛生芽；

3）继代培养：将步骤2中培养得到的丛生芽长至1-2cm时，转接入增殖培养基中进行继代培养，接种后在18-25℃，光照12-16h，光照强度为1500-2000lx条件下培养，得到丛生芽；

4）生根培养：将步骤3中培养得到的丛生芽切割为1.5-3cm的丛生芽接种到生根培养基中，在25-30℃，光照15-16h，光照强度为4000-5000lx条件下培养，至生根；

5）炼苗：将步骤4中生根的小苗，取其培养瓶放置于自然环境下3-5天，然后将苗取出移栽入由80%的泥炭土加20%的珍珠岩组成的基质中，每天用大量元素营养液给幼苗浇水，待幼苗成活后，获得扩繁苗。

所述步骤2中的诱导培养基为：WPM+1～3mg/L6-BA+0.1～1mg/L NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH 为5.4～5.8。

所述步骤3中的增殖培养基为：MS+0.1～1mg/LIBA+1～4mg/L 6-BA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH 为5.4～5.8。

所述步骤4中的生根培养基为：1/2MS+0.1～2mg/L NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

本发明与现有技术相比具有的有益效果是：本发明通过无性快繁技术快速获得大量丽格海棠优良品种木苗的方法。以丽格海棠单芽顶端为外植体，经过外植体消毒、芽初代诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽等步骤建立了丽格海棠组织培养快繁技术体系，为今后丽格海棠组织培养繁殖苗木，加速良种繁育满足市场需求提供技术支持。本发明所采用的低温诱导和继代培养，降低了培养苗体的玻璃化和褐化的风险。