[发明专利]西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法

权利要求书

1.西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：包括以下步骤，

(1)、外植体的选择：采取西南远志茎段上新发的叶片作为外植体，采取时间选择晴天下午3-4点，采取完成后即进行消毒；

(2)、外植体的诱导培养：将步骤(1)中经消毒处理的无菌外植体放在已灭菌的不锈钢盘中，用无菌手术刀切除外植体基部坏死部分，然后叶面向上平放在诱导培养基内，然后将操作完成的外植体放至培养间，设置温度22～25℃，设置光照时间14h/天，设置光照强度3000LX，30天即可分化出丛生芽，每片叶片可分化出15-25个丛生芽；

(3)、外植体的增殖培养：将步骤(2)中的丛生芽切成5-6个丛生芽的小块转接入增殖培养基中，设置温度22～25℃，设置光照时间16h/天，设置光照强度3000LX，培养周期15-20天，即可得到丛生苗；

(4)、外植体的壮苗培养：将步骤(3)中的丛生苗分成小块，每块8-10棵丛生苗，放入壮苗培养基中，温度光强与外植体的增殖培养相同，20～25天后即可得到粗壮健康的苗木；

(5)、外植体的生根培养：将步骤(4)中的苗木分成单苗，插入生根培养基内，然后将操作完成的外植体放入培养室，设置温度22～25℃，先进行48小时的暗培养，然后设置光照时间12h/天，设置光照强度2000LX，15-20天后，得到根系洁白，茎杆建壮的西南远志生根苗。

2.根据权利要求1所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：步骤(1)中所述消毒方法如下：

S1：将外植体放入洗涤剂水中浸泡5分钟并轻轻搅拌，然后流水冲洗三分钟，最后放置于干燥的无菌瓶内备用；

S2：将外植体放入无菌水内漂洗一遍，然后放入75％的酒精内浸泡30秒，再次放入无菌水内漂洗一遍，放入5％次氢酸钠中浸泡5分钟，再次放入无菌水漂洗一遍。

3.根据权利要求2所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：所述流水为自来水。

4.根据权利要求1所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：步骤(2)中所述的诱导培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L，马铃薯汁100g/L，琼脂4.5g/L，肌醇0.1g/L，白砂糖30g/L。

5.根据权利要求1所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：步骤(3)中所述增殖培养基为MS+KT3mg/L+NAA0.2mg/L，琼脂4.5g/L，肌醇0.1g/L，白砂糖30g/L。

6.根据权利要求1所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：步骤(4)中所述壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg/L，琼脂4.5g/L，肌醇0.1g/L，白砂糖30g/L。

7.根据权利要求1所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：步骤(5)中所述生根培养基上述生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L，活性碳1g/L，琼脂4.5g/L，肌醇0.1g/L，白少糖20g/L。

8.根据权利要求1所述的西南远志叶片组培快速繁殖成苗方法，其特征在于：步骤(2)～(5)中，设置温度最佳为23℃。