[发明专利]一种鉴定辣椒分枝类型的分子标记及应用在审
| 申请号： | 202011329359.5 | 申请日： | 2020-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN112322770A | 公开（公告）日： | 2021-02-05 |
| 发明（设计）人： | 巩振辉;盖文贤;马潇;他文山;郭帆;边振 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学;酒泉市华美种子有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 王孝明 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 辣椒 分枝 类型 分子 标记 应用 | ||
1.一种鉴定辣椒分枝类型的分子标记，其特征在于，该分子标记的正向引物序列为：5′–GGTTGAAGTTAATGGTGGTG–3′，反向引物序列为：5′–CTGTCGTAAAAGGAATAGCC–3′。
2.如权利要求1所的鉴定辣椒分枝类型的分子标记用于辣椒分枝类型辅助育种中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，该应用的具体方法包括以下步骤：
步骤一，提取待测辣椒样品的DNA；
步骤二，以步骤一提取的DNA为模板，根据分子标记进行PCR扩增；
所述的PCR的反应程序中的退火温度为56℃～64℃；
步骤三，采用质量分数为1％的琼脂糖凝胶电泳检测步骤二得到的PCR产物，获得条带的长度，根据条带的长度来判断辣椒分枝类型的结果。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的PCR采用10μL反应体系：包括10-100ng模板DNA 1-2μL，浓度10μmol/L正、反向引物各0.5μL，2.5mM dNTPs 0.2μL，Buffer 1μL,DNA Polymerase 0.1μL及适量ddH2O。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的PCR的反应程序为：94℃预变性5min，94℃变性30s，根据引物的退火温度复性30s，72℃延伸2min，30次循环后72℃延伸10min；4℃存储。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的退火温度为60℃。
7.如权利要求3所述的应用，其特征在于，若PCR产物存在1760bp条带，则待测辣椒样品为无限分枝；若PCR产物只存在2621bp条带，则待测辣椒样品为有限分枝。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，存在1760bp条带的PCR产物的序列见SEQ IDNO.3，只存在2621bp条带的PCR产物的序列见SEQ ID NO.4。
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