[发明专利]一种高效转化维生素D3为其活性形式的菌株及其应用

权利要求书

1.一种巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)H-1，其特征在于：于2020年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.20362。

2.一种维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：使用如权利要求1所述的巨大芽孢杆菌( Bacillus megaterium)H-1。

3.根据权利要求2所述的维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：转化维生素D3为25-OH-VD3和1α，25-diOH-VD3。

4.根据权利要求2或3所述的维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：具体方法为：制备巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)H-1的菌株种子液，接入转化培养基培养，得到的菌液中加入维生素D3，经生物转化后得转化液。

5.根据权利要求4所述的维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：菌株种子液使用的种子培养基成分及配比为：葡萄糖5-20g/L，胰蛋白胨5-20g/L，酵母提取物5-15g/L，玉米浆5-15g/L，NaCl 5-15g/L，(NH4)₂SO₄ 1-10g/L，KH₂PO₄ 1-10g/L，MgSO₄ 1-10g/L，CaCO₃1-10g/L；生物转化使用的转化培养基的成分及配比为：葡萄糖5-20g/L，胰蛋白胨5-20g/L，酵母提取物5-15g/L，玉米浆5-15g/L，NaCl 5-15g/L，(NH4)₂SO₄ 1-10g/L，KH₂PO₄ 1-10g/L，MgSO₄ 1-10g/L，CaCO₃ 1-10g/L，羟丙基-β-环糊精10-100g/L。

6.根据权利要求4所述的维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：加入维生素D3的时间节点为菌株在培养基中生长12-24h后。

7.根据权利要求4所述的维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：维生素D3共10-250mg溶于250μL乙醇后，再投入菌液中。

8.根据权利要求4所述的维生素D3的体外微生物转化方法，其特征在于：投入菌体发酵液中的维生素D3的终浓度为0.2-5g/L。