[发明专利]一种用于快速细胞免疫组化的细胞保存液及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202011333938.7 申请日: 2020-11-24
公开(公告)号: CN112400861B 公开(公告)日: 2022-02-22
发明(设计)人: 米贯勋;牛银银;杨潇燕;崔红米;李三华;刘文弟;齐华 申请(专利权)人: 河南赛诺特生物技术有限公司
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02;G01N33/569
代理公司: 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 代理人: 牛爱周
地址: 450001 河南省郑州*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 快速 细胞 免疫 保存 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,主要由缓冲液、红细胞裂解试剂、渗透压维持剂、细胞形态维持试剂、固定剂、防腐剂、粘液处理试剂、抗聚集试剂以及用于细胞免疫组化细胞抗原处理的试剂组成;其中,所述用于细胞免疫组化细胞抗原处理的试剂包括福尔马林和水杨酸锌;所述缓冲液的含量为50%-70%(v/v);所述红细胞裂解试剂的含量为0.1%-1.0%(v/v)或0.5%-1.0%(w/v);所述渗透压维持剂的含量为0.01%-1.14%(w/v);所述细胞形态维持试剂的含量为0.5%-1.0%(v/v);所述固定剂的含量为15%-25%(v/v);所述防腐剂的含量为0.05%-0.1%(v/v);所述粘液处理试剂的含量为0.5%-1.5%(w/v)、所述抗聚集试剂的含量为0.05%-0.1%(w/v);所述福尔马林的含量为5.0%-7.0%(v/v),所述水杨酸锌的含量为1.0%-3.0%(w/v);所述红细胞裂解试剂为TritonX-100或NH4Cl;当红细胞裂解试剂为TritonX-100时,其含量为0.1%-1%(v/v);当红细胞裂解试剂为NH4Cl时,其含量为0.5%-1%(w/v)。

2.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述缓冲液为Tris缓冲液或者磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述渗透压维持剂为NaCl、KCl、MgCl2中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述细胞形态维持试剂为PEG4000,其含量为0.5%-1%(v/v)。

5.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述固定剂为醇类,所述的醇类为甲醇、乙醇、乙二醇、丙醇、异丙醇中的一种或几种,所述固定剂的含量为15%-25%(v/v)。

6.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述防腐剂为proclin300或proclin950,其含量为0.05%-0.1%(v/v)。

7.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述粘液处理试剂为TCEP或巯乙磺酸钠,其含量为0.5%-1.5%(w/v)。

8.根据权利要求1所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液,其特征在于,所述抗聚集试剂为EDTA- 2Na或柠檬酸钠,其含量为0.05%-0.1%(w/v)。

9.权利要求1-8中任一项所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液的制备方法,包括如下步骤:

在双蒸水中加入缓冲液、渗透压维持剂、细胞形态维持试剂、红细胞裂解试剂、抗聚集试剂及粘液处理试剂,混匀后得到溶液A;

在溶液A中加入固定剂醇类,混匀后得到溶液B;

配制福尔马林水杨酸锌混合液,得到溶液C;

将溶液C加入溶液B中,混匀,得到溶液D;

在溶液D中加入防腐剂,使用双蒸水补充至1L,稀盐酸调整pH至6.8,得到细胞保存液。

10.权利要求1-8中任一项所述的用于快速细胞免疫组化的细胞保存液在保存或收集细胞样本中的应用。

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