[发明专利]一种快速测定金银花或紫苏子中异鼠李素的二阶校正方法

说明书

本发明属于中草药化学成分分析领域，具体涉及一种快速测定金银花或紫苏子中异鼠李素的二阶校正方法。本发明通过引入酸度梯度，构建出分子吸收光谱‑酸度二阶数据，将每个校正样本的二阶数据依次堆叠，基于约束交替三线性分解算法分析数据以提取异鼠李素的纯光谱信号，结合异鼠李素的浓度，建立二阶校正模型。借助上述模型，可以克服未知样中未知干扰的影响，实现两种中草药金银花和紫苏子预测样本中异鼠李素的快速、准确定量分析。该方法所用仪器简单便宜，具有二阶优势，能在真实的不同复杂体系中实现快速定量分析，从而可以简化样本预处理和化学分离的要求，节约时间、劳力和试剂。

技术领域

本发明属于中草药化学成分分析领域，涉及一种快速测定金银花或紫苏子中异鼠李素的二阶校正方法。

背景技术

中草药金银花是忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花，具有清热解毒，疏散风热的药效。中草药紫苏子是唇形科植物紫苏Perillafrutescens(L.)Britt.的干燥成熟果实，具有降气化痰，止咳平喘，润肠通便的药效。它们的活性成分都包括黄酮类化合物，其中的异鼠李素具有止咳祛痰，消食化滞，活血散瘀的功效。目前黄酮类化合物的分析方法包括：中国药典中推荐的高效液相色谱法和常用的单波长紫外可见分光光度法，高效液相色谱法准确，但是需要比较费时费力的预处理和色谱分离步骤；常用的单波长紫外可见分光光度法简单，但是通过单波长点建立的标准曲线只能测定黄酮类化合物总含量并且误差比较大，难以准确测定单个分析物。

发明内容

针对现有技术费时费力和误差比较大的技术问题。本发明的目的是提供一种快速测定金银花或紫苏子中异鼠李素的二阶校正方法。基于常见的紫外可见光谱仪，通过构建吸收光谱-酸度二阶数据，结合约束交替三线性分解算法，开发快速、直接、准确测定金银花和紫苏子中的黄酮类化合物异鼠李素的二阶校正方法。

为达到上述目的，主要提供如下技术方案：

一种快速测定金银花或紫苏子中异鼠李素的二阶校正方法，包括如下操作步骤：

(1)确定校正浓度范围：用超纯水配制异鼠李素的储备溶液和工作溶液；基于紫外可见光谱仪确定异鼠李素的校正浓度范围；用磷酸氢二钠-柠檬酸配制酸度分别等于3.5、4.0和4.5的缓冲溶液；

(2)配制校正样品溶液：选取6-8个不同浓度的异鼠李素标准溶液；每个浓度分别配制上述的三个酸度的样本，即得到不同浓度的三个酸度梯度的校正样品溶液；

(3)构建校正集的二阶数据矩阵：分别在紫外可见吸收光谱仪上测定吸收光谱，将三个酸度梯度样本的吸收光谱排列成451×3的二阶数据矩阵，即构建出单个校正样本的吸收光谱-酸度二阶数据矩阵；

(4)配制中草药萃取液：将金银花或紫苏子烘干，磨成粉末，用体积分数为50％的乙醇超声萃取，过滤得到金银花或紫苏子萃取液；

(5)构建预测样本的二阶吸收光谱矩阵：分别取金银花或紫苏子萃取液，配制成上述的三个酸度的样本，分别在紫外可见吸收光谱仪上测定吸收光谱，将三条光谱排列成451×3的二阶数据矩阵，即构建出单个金银花或紫苏子预测样本的吸收光谱-酸度二阶数据矩阵；

(6)三线性分解：将校正集和金银花或紫苏子预测集的二阶数据矩阵堆叠成三维数据阵列，选择组分数为6，选取光谱区间，使用交替约束三线性分解算法分解上述三维数据阵列，分解得到吸收光谱矩阵、酸度轮廓矩阵和相对强度矩阵；

(7)回归、预测：基于校正样本，将异鼠李素的相对强度对浓度进行回归得到回归曲线；基于回归曲线和金银花或紫苏子预测样本中异鼠李素的相对强度，预测异鼠李素在金银花或紫苏子预测样本中的浓度；换算得到金银花或子苏子中异鼠李素的含量。

作为优选，所述步骤(1)中异鼠李素的储备溶液的浓度为1100μg·mL^-1，工作溶液得浓度为50μg·mL^-1。