[发明专利]一种有效降低黑色素的人参补水液及其制备方法

权利要求书

1.一种有效降低黑色素的人参补水液，包括：人参提取物0.5-5份、维生素C 5-10份、维生素E 0.3-2、甘油1-5份、透明质酸1.8-4份、乙二醇0.5-3份、月桂酸乙酯0.4-1.8份、柠檬酸1-2份、EDTA二钠0.8-2.5份、香精0.1-0.8份、水50-200份。

2.根据权利要求1所述的一种有效降低黑色素的人参补水液，其特征在于：所述人参提取物1份、维生素C 8份、维生素E1.2、甘油3份、透明质酸3份、乙二醇1.8份、月桂酸乙酯1.2份、柠檬酸1.6份、EDTA二钠1.7份、香精0.3份、水100份。

3.一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，包括以下具体步骤：

步骤一：人参提取物的制备：取人参发状根洗净，超微粉碎，加入纯净水搅拌均匀后静止2-4h，8000-12000rpm离心20-40min，取上清液得人参提取物；

步骤二：将人参提取物冷冻干燥，制得人参EGF冻干粉，添加维生素C、维生素E混合均匀，制得冻干粉-粉剂；

步骤二：将甘油、月桂酸乙酯、EDTA二钠混合后，边搅拌边加热至60-90℃，使其充分融化制得A相；

步骤三：将乙二醇、透明质酸、柠檬酸、去离子水混合后，边搅拌边加热至80-100℃，使其充分融化制得B相；

步骤四：将A相加入B相中，混合搅拌均匀，然后加入人参提取物、熊果苷、香精，充分搅拌混合均匀后冷却至室温，即得溶解剂-水剂；

步骤五：使用前将粉剂与水剂摇晃混合均匀即可。

4.根据权利要求3所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述人参提取物，提取自外植体发状根中，外植体可以为芽、根、茎、叶片、叶柄。

5.根据权利要求4所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述外植体发状根，用发根农杆菌对人参外植体进行侵染；取芽为外植体，外植体龄为7-14D，超声波处理时间4s，预培养和共培养48-72h，侵染时间为5-10min。

6.根据权利要求5所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述共培养培养基pH值为5-6.2，蔗糖浓度为3-6％，添加0.1mg/mL的NAA。

7.根据权利要求6所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述发根农杆菌菌株为A4。

8.根据权利要求7所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述发根农杆菌其Ri质粒含有EGF-TAT基因，通过PCR扩增EGF基因、TAT基因，经酶切后，连接到Ri质粒。

9.根据权利要求8所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述人参发状根进行PCR检测：根据设计的一对EGF-TAT基因引物，电泳检测出现了与基因引物相同的条带，而未转化的人参外植体则没有扩增出条带，证明重组基因己经整合进毛状根的基因组中。

10.根据权利要求9所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法，其特征在于：所述人参发状根转接到液体培养基中扩大增殖培养：用MS液体培养基，蔗糖浓度为30g/L，添加0.5mg/L KT-1、0.2mg/L 6-BA、3mg/L IAA、活性炭3g，培养25-35D。