[发明专利]一种长链非编码基因及其相关生物材料与应用

说明书

本发明公开了一种长链非编码基因，其为MIR4435‑2HG基因敲除第1090‑1149位后的核酸分子或MIR4435‑2HG基因敲除第1235‑1294位后的核酸分子。将本发明所述的长链非编码基因导入巨噬细胞的实验证明，与表达MIR4435‑2HG基因的巨噬细胞相比，表达本发明所述的长链非编码基因的巨噬细胞显著延缓了细胞凋亡，有望在输血及制备治疗癌症的药物中进行应用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中一种长链非编码基因及其相关生物材料与应用。

背景技术

血小板浓缩物(PC)在临床输血治疗中具有重要作用，在大量失血和化疗、放疗等处理后造成的血小板减少症患者的治疗过程中，均需要进行血小板输注。由于血小板难于体外保存及开展功能实验，人血小板源细胞外囊泡(P-EVs)的发现为开展血小板功能的研究提供了解决思路。血小板浓缩物在制备和储存的过程会生成大量P-EVs，P-EVs作为细胞间信息传递的重要媒介，其内携带大量血小板中的遗传信息，其中长链非编码RNA(LncRNA)在细胞的分化、增殖以及凋亡等生理过程中具有重要调节作用，体外P-EVs的输注对机体免疫的调节的潜在作用尚未得到阐明。临床在输血治疗中出现了大量与输血相关损伤并被认为与P-EVs相关，寻找其潜在的作用机制对指导输血治疗十分必要。

MIR4435-2HG在一些肿瘤细胞(如肺癌和胃癌)中异常过度表达，并参与肿瘤的进展。BCL2L11是BCL2家族中促凋亡的成员。BCL2L11位于线粒体外膜，通过转运凋亡诱导因子，诱导线粒体去极化，从而触发线粒体凋亡途径。BCL2L11调节免疫反应，其过早激活可阻碍细胞毒性T细胞的成熟，导致慢性炎症、肿瘤进展等病理生理事件的发生。MIR4435-2HG可以上调巨噬细胞中mRNA BCL2L11的表达，从而促进巨噬细胞的凋亡从而发挥免疫抑制进而在癌症中促进疾病的进展。

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题是如何延缓细胞凋亡的能力。

为了解决以上技术问题，本发明首先提供了一种长链非编码基因，其为MIR4435-2HG基因敲除其与EIF3G的结合位点后的的核酸分子；所述MIR4435-2HG基因的核苷酸序列如序列表的序列3所示；所述与EIF3G的结合位点为序列表的序列3第1090-1149位核苷酸或序列表的序列3第1235-1294位的核苷酸。

上述长链非编码基因中，所述MIR4435-2HG基因(ENST00000661655)是来源于人血小板源细胞外囊泡的长链非编码基因，其核苷酸序列如序列表中的序列3所示，由1496个核苷酸组成。

上述长链非编码基因中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。

上述长链非编码基因中，所述核酸分子为如下b1)-b4)任一所示的基因：

b1)编码链的编码序列是序列表中序列3敲除第1090-1149位后的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

b2)编码链的核苷酸是序列表中序列3敲除第1090-1149位后的cDNA分子或DNA分子；

b3)编码链的编码序列是序列表中序列3敲除第1235-1294位后的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

b4)编码链的核苷酸是序列表中序列3敲除第1235-1294位后的cDNA分子或DNA分子。

与所述长链非编码基因相关的生物材料也属于本发明的保护范围。

本发明所提供的与所述长链非编码基因相关的生物材料，为下述B1)至B5)中的任一种：

B1)含有所述长链非编码基因的表达盒；

B2)含有所述长链非编码基因的重组载体、或含有B1)所述表达盒的重组载体；