[发明专利]一种氨基酸饱和型羊膜补水面膜及其制备方法

权利要求书

1.一种氨基酸饱和型羊膜补水面膜，其特征在于，所述面膜包括氨基酸浓缩液，羊膜基质层及面膜支持物，所述氨基酸浓缩液为以绒毛膜为原料制成的氨基酸浓缩营养液，所述羊膜基质层为动物胎盘羊膜脱去上皮细胞制成，所述氨基酸浓缩液饱和吸附在羊膜基质层上，所述羊膜基质层贴合在面膜支持物上。

2.根据权利要求1所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜，其特征在于，所述面膜中氨基酸含量≥3.5mg/ml。

3.根据权利要求1所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜，其特征在于，所述面膜中氨基酸种类为16～18种。

4.根据权利要求1所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜，其特征在于，所述动物为绵羊、山羊及鹿。

5.一种如权利要求1～4所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：羊膜、绒毛膜分离→羊膜预处理→羊膜脱细胞处理→脱细胞羊膜、绒毛膜净化消毒→氨基酸饱和型脱细胞羊膜制备→支持物贴合→密封包装→氨基酸饱和型羊膜补水面膜。

6.根据权利要求5所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)羊膜、绒毛膜分离：将胎盘清洗后钝性分离羊膜和绒毛膜，再分别清洗；

(2)羊膜预处理：将分离出的羊膜浸渍于1％的TritonX-100PBS溶液中，4℃振荡24h；

(3)羊膜脱细胞处理：首先，用胰蛋白酶+胰脂酶+EDTA混合液处理预处理后的羊膜，用蒸馏水反复清洗清除细胞碎片；其次，用DNA酶除去残留的细胞核成分，再用蒸馏水反复清洗去除细胞与细胞核残质；

(4)脱细胞羊膜、绒毛膜净化消毒：将脱细胞后的羊膜、分离出的绒毛膜清洗后分别用含有双抗的无菌生理盐水浸渍消毒，之后用灭菌生理盐水清洗、晾干；

(5)氨基酸饱和型脱细胞羊膜制备：将消毒后的脱细胞羊膜浸渍于绒毛膜氨基酸浓缩液中，2～8℃下24小时饱和吸附；取出后，羊膜上皮面朝上，2～8℃晾干；

(6)支持物贴合：将上述氨基酸饱和型脱细胞羊膜上皮面朝上与涂了纤维蛋白胶的支持物贴合；

(7)检验：按《化妆品安全技术规范》(2015版)的要求抽样，对上述制成的面膜分别进行性状检验、微生物检验、氨基酸含量测定和毒理学检验；

(8)密封包装：检验合格的产品密封包装，即制成所述面膜。

7.根据权利要求6所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中所述胰蛋白酶+胰脂酶+EDTA混合液的制备方法为：0.25％胰蛋白酶7份、0.20％胰脂酶2份、0.05％EDTA 1份(V/V)按比例配制，保存于4℃备用；步骤(3)的具体操作为：取预处理后的羊膜浸渍于上述混合液中，37℃温育1小时，取出羊膜，用细胞刮子帮助脱去上皮细胞，反复冲洗；之后将其浸入DNA酶溶液中，37℃温育1小时后取出羊膜，反复冲洗，成为羊膜脱细胞基质。

8.根据权利要求6所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中所述浸渍时间不低于12小时。

9.根据权利要求6所述的氨基酸饱和型羊膜补水面膜的制备方法，其特征在于，在步骤(5)中所述绒毛膜氨基酸浓缩液的制备方法为：(1)组织破碎：将绒毛膜组织绞/剪碎；(2)组织匀浆：绞/剪碎的组织按1:0.8与注射用水混合，经胶体磨匀浆处理15～30min得到组织匀浆液；(3)细胞破碎：将匀浆液反复冻融(-18～20℃)3～6次；(4)离心处理：将细胞破碎后的匀浆液于4℃下、4000～6000rpm离心40～60min，收集上清液；(5)灭活：离心上清液中加入终浓度为0.01％的β-丙内酯，混匀，在2～8℃下灭活24h，灭活后置37℃下水解2h；(6)检验：按GB/T5009.124-2003法测定氨基酸的种类和含量；(7)分装：在洁净条件下分装，即为绒毛膜氨基酸浓缩液。