[发明专利]一种鸡蛋免疫荧光检测试纸条及应用和检测方法

权利要求书

1.一种鸡蛋免疫荧光检测试纸条，其特征在于，所述试纸条上包括由左到右首尾相连且依次固定在PVC底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上包被有荧光胶乳微球标记的混合抗体；所述混合抗体包括：抗卵白蛋白抗体、抗卵类黏蛋白抗体、抗卵转铁蛋白抗体和抗鸡蛋总抗体；

所述硝酸纤维素膜上包括平行的4条检测线和1条质控线；所述检测线上分别包被抗卵白蛋白抗体、抗卵类黏蛋白抗体、抗卵转铁蛋白抗体和抗鸡蛋总抗体；所述质控线上包被兔抗鼠IgG抗体；

所述检测线上的包被抗体与所述荧光胶乳微球标记的混合抗体为配对抗体。

2.根据权利要求1所述免疫荧光检测试纸条，其特征在于，所述荧光胶乳微球的粒径为50～500nm。

3.根据权利要求1所述免疫荧光检测试纸条，其特征在于，所述包被有荧光胶乳微球标记的混合抗体的结合垫的制备方法，包括：a.将荧光标记的链霉亲和素和胶乳微球吸附结合，得到荧光胶乳微球；

b.将生物素与所述混合抗体结合，得到生物素化混合抗体；

c.将所述荧光胶乳微球和所述生物素化混合抗体混合，得荧光胶乳微球标记的混合抗体；

d.将所述荧光胶乳微球标记的混合抗体喷涂在结合垫上；

步骤a和b之间不具有时间上的先后关系。

4.根据权利要求3所述免疫荧光检测试纸条，其特征在于，步骤a所述荧光标记包括异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明或荧光素CY5。

5.根据权利要求3所述免疫荧光检测试纸条，其特征在于，步骤d所述喷涂时，将所述荧光胶乳微球标记的混合抗体按照2～10μl/cm的用量喷涂在结合垫上。

6.根据权利要求1或3所述免疫荧光检测试纸条，其特征在于，所述混合抗体中抗卵白蛋白抗体、抗卵类黏蛋白抗体、抗卵转铁蛋白抗体和抗鸡蛋总抗体的质量比为1：1：1：1。

7.根据权利要求1所述免疫荧光检测试纸条，其特征在于，4条所述检测线上包被抗卵白蛋白抗体、抗卵类黏蛋白抗体、抗卵转铁蛋白抗体和抗鸡蛋总抗体的包被浓度均为0.5～5.0μl/cm；

所述质控线上包被兔抗鼠IgG抗体的包被浓度为0.5～5μl/cm。

8.权利要求1～7任一项所述免疫荧光检测试纸条在检测食品中鸡蛋过敏原成分中的应用。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述花生过敏原成分包括卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵转铁蛋白和总鸡蛋蛋白。

10.一种检测食品中鸡蛋过敏原成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：滴加100～120μl的食品溶液于权利要求1～7任一项所述免疫荧光检测试纸条的样品垫上，15min后读取所述检测试纸条的荧光信号，根据标准曲线测定花生过敏原的成分和含量；

所述标准曲线为R²＝0.9997；

其中x为过敏原浓度，单位IU/ml，y为荧光信号比值。