[发明专利]一种二聚异喹啉生物碱化合物及其制备和用途

权利要求书

1.一种二聚异喹啉生物碱化合物，其结构通式如式(A)所示；二聚异喹啉生物碱化合物包括所述通式(A)所示化合物，或其结晶、或其手性异构体、或其糖苷、或其药学形式上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物：

其中：

R1～R8分别独立地选自为氢、卤素(F、Cl、Br、I中的一种)、羟基、羧基、C1～C6烷氧基、糖基、C1～C6的烷基、C2～C6的烯基中的一种。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：R1选自甲基，R2、R5选自氢，R3、R4、R6、R7选自甲氧基，R8选自羟基，所述式(A)化合物如式(I)所示

3.根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，化合物I的立体构型分别选自(1R,1′R),(1R,1′S),(1S,1′R),(1R,1′S)中的一种或二种以上。

4.根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，化合物I的立体构型分别优选(1R,1′R)。

5.一种权利要求1-4任一所述的化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)药材提取：北豆根干燥药材1公斤～100公斤，每公斤药材加入6～10L体积分数50％～90％的乙醇浸泡，浸泡1～24h，加热至50℃～90℃提取1～3h，过滤得提取液；固体物料中再按每公斤药材加入6～10L体积分数50％～90％的乙醇重复提取过滤过程0-4次，共进行提取和过滤操作过程1～5次，合并提取液，所得的提取液浓缩至按每公斤药材计0.3～0.6L，即得北豆根提取液；

(2)总碱制备：在上述北豆根提取液中加入体积浓度0.1％～3％的硫酸调pH至1～4后，加入该酸调后的提取液体积的1～3倍体积的乙酸乙酯萃取，分层，获得乙酸乙酯萃取层和酸水层，酸水层再次加入乙酸乙酯重萃取分层过程0-4次，共萃取1～5次，再在酸水层中加入弱碱(质量浓度25-28％氨水)调pH至8～10，接着加入碱调后的样品体积的1～3倍体积的正丁醇萃取，分层，获得正丁醇和碱水层，碱水层再次加入正丁醇重萃取分层过程0-4次，共萃取1～5次，合并正丁醇有机层，除正丁醇浓缩，即得北豆根粗碱，然后通过离子交换色谱柱，脱色除杂，即得精制的总碱；

(3)将步骤(2)所得总碱采用C18HCE填料(粒径5～60μm)的反相柱进行分离纯化，采用体积比为0：100～100：0的(体积浓度0.01％～5％)甲酸-甲醇/(体积浓度0.01％～5％)甲酸-水溶液线性梯度洗脱，按峰收集，得到馏分F1～F8；

(4)将步骤(3)所得子馏分F6经过反相制备级HPLC制备，色谱柱为C18CE固定相(5～60μm，20×250～100×250mm)，流动相A为(体积分数0.01％～10％)氨水-甲醇，B为(体积分数0.01％～10％)(质量浓度为25％～28％的氨水)-水，洗脱梯度为0～80分钟，0％A～95％A(V/V)，按峰收集，共得到8个子馏分，分别为F6-1～F6-8；

(5)将步骤(4)所得子馏分F6-7经过制备级HPLC制备，色谱柱采用常规C18固定相(5～60μm，4.6×250～20×250mm)，流动相为乙腈和水(各含体积分数0.01～1％的三氟乙酸)，洗脱梯度为0～60分钟，5％A～95％A，所得馏分再经过C18CE(5～60μm，4.6×250～20×250mm)，洗脱梯度为0～60分钟，0％A～90％A，所得馏分再继续通过C18HCE固定相(5～60μm，4.6×250～20×250mm)，流动相A为体积分数(0.01～1％)甲酸-甲醇，B为体积分数(0.01～1％)甲酸-水，洗脱梯度为0～40分钟，0％A～90％A(V/V)，按峰收集，得到化合物I。