[发明专利]用于重编程细胞的方法在审
申请号: | 202011345680.2 | 申请日: | 2020-11-26 |
公开(公告)号: | CN112538458A | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
发明(设计)人: | 林伟锋 | 申请(专利权)人: | 北京赛尔湃腾科技咨询合伙企业(有限合伙) |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N5/0797;C12N5/071;C12N5/0775;C12N5/0735;C12N5/10;A61K35/30;A61P27/02;A61P27/06;A61P27/12;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京汉智嘉成知识产权代理有限公司 11682 | 代理人: | 金洁;郇春艳 |
地址: | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 编程 细胞 方法 | ||
1.一种用于将第一类型的细胞重编程成第二类型的细胞的方法,其包含在第一组重编程因子存在下培养所述第一类型的细胞,其中所述第一组重编程因子包含糖原合酶激酶3(GSK3)抑制剂、转化生长因子-β(TGFβ)抑制剂以及环状AMP诱导剂。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一组重编程因子进一步包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、DNA甲基转移酶抑制剂、DOT1L抑制剂、组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、BMP4或其组合。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一组重编程因子由以下组成:(a)GSK3抑制剂、TGFβ抑制剂以及环状AMP诱导剂,(b)GSK3抑制剂、TGFβ抑制剂、环状AMP诱导剂以及bFGF,或(c)GSK3抑制剂、TGFβ抑制剂、环状AMP诱导剂、DNA甲基转移酶抑制剂、DOT1L抑制剂以及组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述GSK3抑制剂选自由以下组成的组:CHIR99021、LiCl、Li2CO3、BIO((2’Z,3’E)-6-溴靛玉红-3’-肟)、TD114-2、坎帕罗酮、TWS119、CBM1078、SB216763、3F8(TOCRIS)、AR-A014418、FRATide、靛玉红3’-肟以及L803。
5.根据权利要求1所述的方法,其中所述TGFβ抑制剂选自由以下组成的组:SB431542、Repsox、616452、LDN193189、A8301、GW788388、SD208、SB525334、LY364947、D4476、SB505124以及曲尼司特。
6.根据权利要求1所述的方法,其中所述环状AMP诱导剂是毛喉素、IBMX、咯利普兰、8BrcAMP、前列腺素E2(PGE2)、NKH477、二丁酰一环腺苷酸(DBcAMP)、Sp-8-Br-cAMPs。
7.根据权利要求2所述的方法,其中所述DNA甲基转移酶抑制剂选自由以下组成的组:5-氮杂-dC、5-氮杂胞苷以及RG108。
8.根据权利要求2所述的方法,其中所述DOT1L抑制剂是EPZ004777。
9.根据权利要求2所述的方法,其中所述组蛋白脱乙酰基酶抑制剂选自由以下组成的组:丙戊酸(VPA)、曲古霉素A(TSA)、伏立诺他、缩酚酸肽、Trapoxin、Depudecin、FR901228以及丁酸盐。
10.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一类型的细胞是体细胞。
11.根据权利要求10所述的方法,其中所述体细胞衍生自中胚层、外胚层或内胚层。
12.根据权利要求10所述的方法,其中所述体细胞是成纤维细胞。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述成纤维细胞选自由以下组成的组:小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)、小鼠尾尖成纤维细胞(TTF)、人胚胎成纤维细胞(HEF)、人新生成纤维细胞(HNF)、成人成纤维细胞(HAF)、人包皮成纤维细胞(HFF)以及其混合物。
14.根据权利要求10所述的方法,其中所述体细胞是人脱落肾上皮细胞。
15.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一类型的细胞是干细胞。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述干细胞选自由以下组成的组:人脐带间充质干细胞、人胚胎干细胞以及诱导多能干细胞(iPSC)。
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