[发明专利]一种药疹血浆外泌体蛋白及其试剂盒

说明书

本发明公开了一种药疹血浆外泌体蛋白，包括蛋白Galectin‑7、蛋白ALG‑2、蛋白MPO、蛋白HSP90、蛋白CALML5、蛋白LCN‑2、蛋白CCAR2、蛋白FTH1、蛋白CTSG、蛋白CRP、角蛋白、肌动蛋白、组蛋白、髓过氧化物酶、基质金属蛋白酶‑9、炎症蛋白中的一种或多种。本发明的外泌体提取方法可以实现对人体体液或细胞的培养产物的高效提取，提取时间短，获得的外泌体纯度高；本发明可用作药疹的生物标记物，可检测是否患有对药疹，也可以进行早期预警和干预，评价药物的疗效。

技术领域

本发明属于血浆外泌体技术领域，更具体地说，尤其涉及一种药疹血浆外泌体蛋白。

背景技术

药疹又称药物性皮炎，是药物通过口服、外用和注射等途径进入人体而引起的皮肤黏膜炎症的反应。药物引起的不良反应非常复杂，大致可以分为：药物过量，不耐受，特发性，副作用，继发作用和过敏反应等。药疹是过敏反应的最常见类型。

外泌体不仅存在于细胞培养液中，也存在于血液、尿液、羊水、母乳、精液、唾液、胸腔积液等体液中，其组成包括脂质双分子层以及细胞来源相关的蛋白质、RNA、DNA等物质。几乎所有的细胞都可以产生外泌体，不同细胞来源的外泌体中既包含与细胞形成、结构和物质转运相关的共有成分，也包含与来源细胞的生物功能相关的特异分子。

目前常用的外泌体提取方法不能满足实际样本中肿瘤细胞外泌体特异性提取和分析的要求，从而对外泌体的后续分析造成干扰。为此，我们提出一种药疹血浆外泌体蛋白及其试剂盒

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种药疹血浆外泌体蛋白及其试剂盒。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种药疹血浆外泌体蛋白，包括蛋白Galectin-7、蛋白ALG-2、蛋白MPO、蛋白HSP90、蛋白CALML5、蛋白LCN-2、蛋白CCAR2、蛋白FTH1、蛋白CTSG、蛋白CRP、角蛋白、肌动蛋白、组蛋白、髓过氧化物酶、基质金属蛋白酶-9、炎症蛋白中的一种或多种。

优选的，包括蛋白Galectin-7、蛋白ALG-2和蛋白LCN-2三者的组合。

优选的，包括蛋白FTH1、蛋白CTSG、角蛋白、肌动蛋白和组蛋白五者的组合。

优选的，所述外泌体蛋白的提取方法具体为：向含有外泌体的待提取液中加入所述提取材料，得到提取混合物；

将所述提取混合物进行离心，使外泌体进入沉淀中，收集沉淀，除去所述沉淀中的所述提取材料，得到外泌体。

优选的，所述提取材料为金属氧化物或修饰有所述金属氧化物的功能材料，所述待提取液为来源于人体的B淋巴细胞、T淋巴细胞、树突状细胞、巨核细胞、体液或者干细胞的培养产物。

当体液的黏度较大(如血浆、唾液)时，可利用体液的稀释液提取外泌体。当体液的黏度较小(如尿液)时，可利用直接利用体液提取外泌体。

培养产物可为采用去外泌体血清配置的培养液培养所述细胞24-48小时得到的培养产物。

一种药疹血浆外泌体蛋白的试剂盒，还包含反转录反应所需试剂、荧光定量PCR反应所需试剂、DEPC处理水、阳性对照和阴性对照、样本外泌体分离及RNA提取所需试剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的一种药疹血浆外泌体蛋白及其试剂盒，本发明的外泌体提取方法可以实现对人体体液或细胞的培养产物的高效提取，提取时间短，获得的外泌体纯度高；本发明可用作药疹的生物标记物，可检测是否患有对药疹，也可以进行早期预警和干预，评价药物的疗效。

具体实施方式