[发明专利]一种胎儿有核红细胞的捕获方法

说明书

本发明实施例提供了一种胎儿有核红细胞的捕获方法，涉及生物检测技术领域，该捕获方法包括采用洗脱剂将捕获装置上捕获的胎儿有核红细胞进行洗脱；洗脱剂选自胰蛋白酶、胃蛋白酶和Gly‑HCl中的任意一种。捕获装置包括导丝和注射器；所述导丝位于所述注射器内，一端固定于所述注射器的活塞上，另一端插入所述注射器的针头的内部，与针头活动连接；所述导丝的表面固定有用于结合胎儿有核红细胞的抗体。捕获时，将导丝置于含胎儿有核红细胞的环境(如孕妇外周血)中进行目的细胞的有效捕获。该捕获方法操作简单，无需昂贵的仪器也能进行胎儿有核红细胞的有效获取，具有极为广泛的临床应用前景。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体而言，涉及一种胎儿有核红细胞的捕获方法。

背景技术

出生缺陷(birth defect)，又称先天性畸形，是患儿在出生时即在外形或体内所形成的(非分娩损伤所引起的)可识别的结构或功能缺陷。其中一部分患儿在出生后死亡，另一部分患儿终身受到出生缺陷的困扰，给家庭和社会带来沉重的精神和经济负担。因此，预防新生儿出生缺陷是提高人口质量的重要内容，产前诊断则是控制出生缺陷的重要手段。

目前，临床上获取胎儿细胞进行产前诊断的金标准是羊膜腔穿刺和宫腔绒毛取样。这些方法的诊断结果虽然准确可靠，但对孕妇和胎儿有宫内感染和流产发生的风险。基于孕妇外周血中游离胎儿DNA(cell-free fetal DNA，cf-fDNA)的无创产前检测(non-invasive prenatal testing，NIPT)，由于本身的局限性，目前仅作为筛查手段应用而非诊断，即NIPT结果为阳性孕妇，仍需要进行有创性诊断。

而孕妇外周血中的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBCs)含有胎儿全部的基因组，被认为是最理想的胎儿遗传物质来源细胞。在研究水平上，FNRBCs已成功地运用到Rh血型鉴定，一些单基因遗传疾病的诊断，如Ouchenne型肌营养不良、小儿苯丙酮尿症、鸟氨酸氨甲酰基转移酶缺陷、甲型血友病等；染色体数目异常遗传病的诊断，如21三体、13三体、18三体等。此外，FNRBCs也可以运用到一些病理产科疾病的产前预测中，如胎儿窘迫、先兆子痫和囊性纤维病等。

Bianchi等(1994)利用PCR方法估计20ml孕妇外周血中含有0-20 个胎儿细胞。Krabchi等(2001)利用FISH和PRINS(primed in situ labeling) 方法估计每毫升孕妇外周血中含有2-6个胎儿细胞。因此要获得足够数量的 FNRBCs用于无创伤性产前诊断必须先进行富集分离。常用的富集分离方法有微流控技术、流式细胞仪分选法、磁激活细胞分选法、密度梯度离心法、亲和素分离法和单细胞显微操作法等。因为孕妇外周血中FNRBCs的含量极低，所以这些体外操作方法都需要大量的孕妇外周血，这极度限制了在临床上的应用。此外，以上这些FNRBCs分离和富集方法有的操作过于复杂，有的需要昂贵的仪器，有的检出效果较差。所以，目前都还不适合作为临床应用的常规方法。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种胎儿有核红细胞的捕获方法。

本发明是这样实现的：

本申请实施例提供了一种胎儿有核红细胞的捕获方法，其包括：获取从捕获有胎儿有核红细胞的捕获装置上洗脱的胎儿有核红细胞；

其中，洗脱时采用的洗脱剂选自胰蛋白酶、胃蛋白酶和Gly-HCl中的任意一种；

所述捕获装置包括导丝和注射器；所述导丝位于所述注射器内，一端固定于所述注射器的活塞上，另一端插入所述注射器的针头的内部，与针头活动连接；所述导丝的表面固定有用于结合胎儿有核红细胞的抗体；

所述方法不以疾病的诊断或治疗为目的。

本发明具有以下有益效果：