[发明专利]一种氨基甲酸乙酯水解酶突变体及其应用有效

专利信息
申请号: 202011348306.8 申请日: 2020-11-26
公开(公告)号: CN112342209B 公开(公告)日: 2022-06-14
发明(设计)人: 吴绵斌;康婷婷;杨祎;林建平;杨立荣 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N9/80 分类号: C12N9/80;C12N15/55;C12P7/06
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 沈金龙
地址: 310013 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 氨基 甲酸 水解 突变体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种氨基甲酸乙酯水解酶突变体,其特征在于,由根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)d3的酰胺酶基因经过突变得到,野生型酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述氨基甲酸乙酯水解酶突变体由野生型酰胺酶经过R94P、I97L、S177C或G195A中的一个位点突变所得,或者,所述氨基甲酸乙酯水解酶突变体由野生型酰胺酶经过以下任意一种突变所得:G195A/R94P、G195A/S177C、I97L/S177C或I97L/G195A。

2.编码如权利要求1所述的氨基甲酸乙酯水解酶突变体的基因。

3.如权利要求1所述的氨基甲酸乙酯水解酶突变体或如权利要求2所述的基因在催化水解氨基甲酸乙酯中的应用。

4.一种水解氨基甲酸乙酯的方法,其特征在于,使用如权利要求1所述氨基甲酸乙酯水解酶突变体催化水解氨基甲酸乙酯。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,催化水解时的pH为6.5~8.5,温度为40℃-65℃。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,催化水解时的pH为7~7.5,温度为50~55℃。

7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,催化水解时体系中乙醇浓度为不高于25%。

8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,催化水解时体系中乙醇浓度为不高于20%。

9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,催化水解时体系中乙醇浓度为不高于10%。

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