[发明专利]一种抗CD40抗体及其应用

说明书

本发明公开一种特异性结合CD40的抗体或其抗原结合部分，属于抗体技术领域。所述抗体或其抗原结合部分的重链可变区CDR‑H1、CDR‑H2、CDR‑H3和轻链可变区CDR‑L1、CDR‑L2、CDR‑L3分别包括SEQ ID NO.3‑8所示的氨基酸序列。本发明的抗CD40抗体具有极高的亲和力和特异性，在相关研究和应用领域有巨大的潜力和优势，另外，其与CD40结合，可以形成类似CD40L‑CD40配受体的复合物，从而启动信号通路，促进B细胞增殖，还可刺激B细胞类别转换，分化成浆细胞。

技术领域

本发明属于抗体领域，具体地，涉及一种抗CD40抗体及其应用。

背景技术

CD40与CD40L互为受配体，CD40是一种相对分子质量为48KD的在免疫系统的B细胞和专门抗原呈递细胞表面以及许多非造血细胞类型和癌细胞中表达的Ⅰ型膜糖蛋白，属于神经生长因子受体/肿瘤坏死因子受体超家族成员。CD40前体含有297个氨基酸，N端为20个氨基酸的信号肽，胞外区有193个氨基酸，跨膜区有22个氨基酸，胞内区有62个氨基酸。其中胞外区的193个氨基酸构成4个富含半胱氨酸的结构域，在铰链区的71个氨基酸中含有9个丝氨酸和7个苏氨酸，是潜在的糖基化位点。CD40的糖基化程度较高，糖基化后的相对分子量可高达40KD～50KD。

CD40L与CD40分子结合后，能使膜CD40分子交联和配基化，继而使CD40分子多聚化，构成CD40信号传导的结构基础和始动因素。通过CD40传导信号活化的NF-κB可激活磷酸络氨酸激酶(PTK)和丝氨酸/素氨酸激酶，这是CD40介导的B细胞活化的关键步骤。B细胞表面的CD40与CD40L结合后，可导致非受体型酪氨酸激酶(JAK3)和信号转导及转录激活因子3(STAT3)的络氨酸磷酸化，从而激活这两个信号转导分子。而JAK3-STAT3信号途径和TRAF信号转导途径，包括TNF受体相关因子2(TRAF2)介导的NF-κb和TRAF3的活化，协同参与了免疫球蛋白的类别转换。表达在CD⁴⁺T细胞表面的CD40L与未致敏的B细胞表面的CD40分子结合后，通过上述信号通路传递给B细胞中必要的活化信号，从而启动B细胞的增殖，类别转换以及分化成浆细胞。

CD40不但在正常的免疫细胞上表达，还可以在许多恶性细胞上表达。例如，CD40在以下疾病中过表达：B系NHL、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多毛细胞白血病(HCL)、霍奇金病、多发性骨髓瘤以及膀胱癌、肾癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、肺癌、鼻咽癌、恶性黑色素瘤等。

因此，开发CD40抗体有助于包括肿瘤在内的相关疾病治疗的辅助诊断。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗CD40抗体及其应用，为此，本发明采用的技术方案如下：

本发明第一方面提供一种抗CD40的抗体或其抗原结合部分，其重链可变区CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3和轻链可变区CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3分别包括SEQ ID NO:3-8所示的氨基酸序列。

在本发明的一些实施方案中，所述抗原结合部分选自Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段、Fv片段、scFv片段、Fd片段和单域抗体。

在本发明的一些实施方案中，重链可变区CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3和轻链可变区CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3分别由SEQ ID NO:3-8所示的氨基酸序组成。

本发明的第二方面提供编码本发明第一方面任一所述抗体或其抗原结合部分的基因，编码重链的基因包括SEQ ID NO.1所示核苷酸序列，编码轻链的基因包括SEQ IDNO.2所示核苷酸序列。

本发明的第三方面提供一种表达载体，包括本发明第二方面所述的基因。在本发明的一些实施方案中，所述载体为原核表达载体或真核表达载体。

本发明的第四方面提供一种宿主细胞，其含有本发明第三方面所述的表达载体。