[发明专利]一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法

权利要求书

1.一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)向废弃毕赤酵母中加入NaOH固体颗粒，再加水形成废弃毕赤酵母悬浊液；将废弃毕赤酵母悬浊液静置，之后置于沸水浴中进行蒸煮，冷却后用98％浓H₂SO₄将pH调至5，得到废弃毕赤酵母预处理液；

2)向废弃毕赤酵母预处理液中加入可溶性CaCl₂固体，使SO₄^2-以CaSO₄的形式沉淀下来，经过滤得到废弃毕赤酵母处理液；

3)对废弃毕赤酵母处理液进行压滤，得到菌泥；再将菌泥制粒，并使用流化床进行干燥，得到废弃毕赤酵母颗粒；

4)将废弃毕赤酵母颗粒作为氮源加入到丁酸梭菌发酵培养基中，再接种丁酸梭菌种子液进行厌氧发酵。

2.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤1)中，废弃毕赤酵母悬浊液中废弃毕赤酵母的含量为300～450g/L。

3.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤1)中，将废弃毕赤酵母悬浊液静置3天后，置于沸水浴中蒸煮60min，再冷却。

4.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤2)中，加入的可溶性CaCl₂固体与废弃毕赤酵母预处理液中SO₄^2-的物质的量的比为1：1。

5.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤3)中，得到的菌泥的含水量为60％～65％。

6.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤3)中，使用流化床进行干燥时，干燥温度50℃，风机风量3500m³/h，干燥时间40min。

7.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤4)中，加入废弃毕赤酵母颗粒后的丁酸梭菌发酵培养基包括如下组分：蔗糖25g/L，废弃毕赤酵母颗粒46g/L，磷酸二氢钾8g/L，硫酸锰0.4g/L，氯化钙2g/L，乙酸钠2g/L，无水硫酸镁1g/L，消泡剂1g/L。

8.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤4)中，加入废弃毕赤酵母颗粒后的丁酸梭菌发酵培养基的初始pH值为5。

9.如权利要求1所述的一种使用废弃毕赤酵母作为氮源的丁酸梭菌发酵方法，其特征在于：步骤4)中，发酵开始前，先通入无菌氮气30min，去除氧气，然后接种丁酸梭菌种子液，再通入无菌氮气10min；使用压力调节阀将发酵罐压维持在0.04～0.05MPa；产气开始后，用氨水将pH值手动控制在5.5～6.5；发酵到20h时，开始流加葡萄糖补料液；当产气明显减弱时，结束发酵。