[发明专利]一种基于多种选择性识别反应的均相可视化和双荧光信号分析方法及应用

说明书

本发明提供了一种基于多种选择性识别反应的均相可视化和双荧光信号分析方法，涉及诊断分析技术领域，该方法包括基于QDs选择性识别Cu²⁺和Cu²⁺与PPi形成的复合物，以及Ce³⁺选择性识别PPi和其它磷酸盐，以得到QDs的荧光信号和PPi‑Ce CPNs的荧光信号，并基于QDs的荧光信号和PPi‑Ce CPNs的荧光信号定量单一目标物。本发明使用PPi‑Ce CPNs和QDs作为双荧光信号分子，定量分析目标物，提高方法的准确性，同时将发光纳米材料Ce³⁺引入生物化学和医学诊断中，实现可视化POCT分析。以及本发明的分析方法可用于焦磷酸酶或者碱性磷酸酶的分析。

技术领域

本发明涉及生物医学诊断分析方法技术领域，尤其是涉及一种基于多种选择性识别反应的均相可视化和双荧光信号分析方法及应用。

背景技术

现有生物化学和医学诊断体系中，主要是依靠单个信号分子的信号强度实现对单一目标物的定量分析。如基于免疫识别反应的酶联免疫吸附分析(ELISA)使用紫外可见分光光度计监测紫外信号、电化学发光策略监测三吡啶钌等的电化学信号、荧光策略监测荧光染料的荧光信号(如FITC、FAM等)等。

虽然，有少数研究者使用双信号分子实现目标分析，其主要是以一种信号分子为内标，以另外一个信号分子的变化而实现定量，即其被称之为比率策略。此外，以上比率策略中，两个信号分子间不存在相互作用，即严格讲体系仅仅对单个信号分子产生影响，并非是双信号策略。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种基于多种选择性识别反应的均相可视化和双荧光信号分析方法，以解决现有技术中依靠单个信号分子实现目标物的定量，且难以可视化读取。此外，即使有少数研究者使用双信号分子实现目标分析，其为比率策略，也并非双信号策略的技术问题。

本发明的目的之二在于提供一种基于多种选择性识别反应的均相可视化和双荧光信号分析方法的应用。

为了实现上述目的之一，本发明一实施例提供了一种基于多种选择性识别反应的均相可视化和双荧光信号分析方法，所述方法包括基于QDs选择性识别Cu²⁺和Cu²⁺与PPi形成的复合物，以及Ce³⁺选择性识别PPi和其它磷酸盐，以得到QDs的荧光信号和PPi-Ce CPNs的荧光信号，并基于QDs的荧光信号和PPi-Ce CPNs的荧光信号定量单一目标物。

根据一种优选实施方式，所述Cu²⁺与PPi形成的复合物包括PPi-Cu²⁺-PPi复合物。

根据一种优选实施方式，所述的基于QDs选择性识别Cu²⁺和PPi-Cu²⁺-PPi复合物以得到QDs的荧光信号。包括利用QDs与Cu²⁺和PPi-Cu²⁺-PPi复合物进行选择性阳离子交换反应，基于Cu²⁺和PPi-Cu²⁺-PPi复合物分别以不同程度淬灭QDs荧光信号，以使各体系分别产生明显不同的可视化的颜色改变。

根据一种优选实施方式，所述Cu²⁺可显著淬灭QDs的荧光信号，所述PPi-Cu²⁺-PPi复合物可抑制Cu²⁺对QDs荧光信号的淬灭。

根据一种优选实施方式，所述Ce³⁺选择性识别PPi和其它磷酸盐以得到PPi-CeCPNs的荧光信号。包括利用Ce³⁺与PPi和其它磷酸盐进行选择性配位聚合反应，形成的PPi-Ce CPNs可发射荧光信号。

根据一种优选实施方式，所述PPi-Ce CPNs的荧光信号在348nm处出峰，所述QDs的荧光信号在670nm处出峰。