[发明专利]靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽及其应用

权利要求书

1.靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列为KG-pY-EQ、KG-pY-IW、HW-pY-KW、NK-pY-GE、RD-pY-LY、HV-pY-SR、PE-pY-YR、DE-pY-FQ中的至少一种；其中pY表示磷酸化酪氨酸。

2.根据权利要求1所述的抗肿瘤多肽，其特征在于：

所述肿瘤为肝癌、乳腺癌中的至少一种。

3.权利要求1或2所述的靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽在制备诊断肿瘤的制剂中的应用。

4.权利要求1或2所述的靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽在制备治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于：所述肿瘤为肝癌、乳腺癌中的至少一种。

5.一种诊断肿瘤的试剂盒，其特征在于：包含权利要求1或2所述的靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：

所述肿瘤为肝癌、乳腺癌中的至少一种。

7.一种治疗肿瘤的药物，其特征在于：包含权利要求1或2所述的靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽。

8.根据权利要求7所述的药物，其特征在于：

所述肿瘤为肝癌、乳腺癌中的至少一种。

9.权利要求1或2所述的靶向PKM2蛋白的抗肿瘤多肽的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）利用一珠一化合物法构建磷酸化酪氨酸多肽库；

（2）将步骤（1）的磷酸化酪氨酸多肽与PKM2蛋白孵育，筛选得到具有特异性结合PKM2蛋白的磷酸化酪氨酸多肽；

步骤（1）中所述磷酸化酪氨酸多肽的结构通式为AA₅AA₄-pY-AA₂AA₁；所述AA_n为L型天然氨基酸，其中，n=1、2、4、5；所述pY为磷酸化酪氨酸；

所述磷酸化酪氨酸多肽的合成方法，包括如下步骤：

S1：将树脂与Fmoc-氨基酸、O-苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲四氟硼酸酯、二异丙基乙胺混合，进行偶联反应，清洗；

S2：将步骤S1中清洗后的树脂均分后，脱保护，清洗，再加入Fmoc-氨基酸、O-苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲四氟硼酸酯、二异丙基乙胺混合，进行偶联反应，清洗；

S3：将步骤S2中清洗后的树脂全部混合，重复步骤S2，直至第五个Fmoc-氨基酸完成偶联反应；然后，加入三氟乙酸-水-三异丙基硅烷，剪切，得到；

步骤（1）中所述磷酸化酪氨酸多肽库包含20⁴条多肽序列，且不具偏好性；

步骤（2）中所述PKM2蛋白标记有荧光基团；

步骤（2）中所述孵育的时间为8～14h；

步骤（2）中所述筛选为根据荧光信号筛选。