[发明专利]人类肝脏支架

权利要求书

1.一种生产人类胰腺支架的方法，包括：

(i)以机械方式破坏健康的或病理的人类胰腺组织中的细胞，所述组织包括整个胰腺或其功能单元，

(ii)通过使所述组织暴露于低渗试剂或高渗试剂中对所述组织中的所述细胞施加渗透应力，

(iii)可任选地使所述组织暴露于蛋白酶和/或DNA酶中，

(iv)使所述组织暴露于洗涤剂中，以及

(v)以任何顺序一次或多次重复步骤(ii)、步骤(iii)和步骤(iv)中的每一个步骤，

由此生产人类胰腺支架。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(ii)至步骤(v)期间，所述人类胰腺组织被施加流体切应力，所述流体切应力通过在逆行方向上灌注所述人体胰腺组织而产生。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，在两次或更多次重复步骤(ii)至步骤(iv)中，所述灌注的速率逐渐增加至最大值，然后保持。

4.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，(i)通过对所述组织进行一轮或多轮冻融，或(ii)通过对所述组织进行HIFU或超声处理，以机械方式破坏所述细胞。

5.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，所述低渗试剂是去离子水和/或所述高渗试剂是水或盐水。

6.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，在步骤(iii)中，使所述组织暴露于蛋白酶中，可任选地是胰蛋白酶或链霉蛋白酶。

7.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，所述洗涤剂是阴离子洗涤剂，可选地是十二烷基磷酸钠(SDS)或脱氧胆酸钠(SdC)。

8.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，所述洗涤剂是离子型洗涤剂，可任选地是聚乙二醇p-(1,1,3,3-四甲基丁基)-二苯醚(Triton X100^TM)。

9.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，所述初始灌注速率是0.1-1.99ml/min/g组织和/或其中所述目标灌注速率是2-20ml/min/g组织。

10.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，步骤(v)包括：

a)通过灌注所述胰腺组织，按以下顺序重复步骤(ii)至(iv)：(ii),(iii),(ii),(iii)(iv),[(ii),(iv)]_n,(ii),(iii),[(ii),(iv)]_n，其中，n是1至25；或

b)通过灌注所述胰腺组织，重复步骤(ii)和(iv)1至25次。

11.根据前述任一权利要求所述的方法，其中，对所述胰腺组织执行如表1中提出的灌注方案。

12.根据前述任一权利要求所述的方法，包括在去细胞化之后对所述支架进行消毒处理。

13.根据前述任一权利要求所述的方法，包括利用细胞重新增殖所述支架以生产人工胰腺组织，可任选地其中，所述细胞是人类原代和细胞系胰腺细胞、人类原代肝细胞、内皮细胞、人类诱导性多能干细胞(iPSC)或源自病人特定iPSC的细胞、人类胚胎干细胞(hESC)、人类间充质干细胞(hMSC)、人类胎儿干细胞、人类癌细胞和人类内皮祖细胞(EPC)。

14.通过根据权利要求1至12中的任一项所述的方法生产的人类胰腺支架或通过权利要求13所述的方法生产的人工胰腺组织。

15.通过根据权利要求1至12中的任一项所述的方法生产的人类胰腺支架在治疗胰腺疾病或机能障碍的方法中的应用，包括：

将所述人类胰腺支架植入到有需要的个体中。