[发明专利]破壁剂组合物及其制备方法和在卵囊的应用

权利要求书

1.一种破壁剂组合物，其特征在于，其包括以下质量百分含量的组份：乙醇10％～40％、溶菌酶0.01％～0.4％、聚乙二醇0.1％～8％、柠檬酸钾0.1％～6％、果糖0.5％～10％、麦芽糖0.5％～5％、氯胺T 0.5％～7％、磷酸二氢钠0.1％～0.8％、磷酸氢二钠0.2％～1％、标准PBS缓冲液2％～5％，其余为注射用水。

2.根据权利要求1所述的破壁剂组合物，其特征在于：所述聚乙二醇为聚乙二醇200。

3.一种破壁剂组合物的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

(1)预备以下质量百分含量的组份：乙醇10％～40％、溶菌酶0.01％～0.4％、聚乙二醇0.1％～8％、柠檬酸钾0.1％～6％、果糖0.5％～10％、麦芽糖0.5％～5％、氯胺T 0.5％～7％、磷酸二氢钠0.1％～0.8％、磷酸氢二钠0.2％～1％、标准PBS缓冲液2％～5％，其余为注射用水；

(2)往所述注射用水中加溶菌酶、聚乙二醇200和柠檬酸钾，搅拌溶解后，获得第一混合物；

(3)往所述第一混合物加入果糖、麦芽糖和氯胺T，搅拌溶解后，获得第二混合物；

(4)往所述第二混合物加入乙醇，搅拌溶解后，获得第三混合物；

(5)往所述第三混合物加入标准PBS缓冲液、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠，调节pH至6.8～7.4。

4.根据权利要求3所述的破壁剂组合物，其特征在于：所述聚乙二醇为聚乙二醇200。

5.根据权利要求3所述的破壁剂组合物，其特征在于：所述步骤(3)中的果糖、麦芽糖和氯胺T按由前至后的顺序依次加入。

6.一种权利要求1-2或3-5任意一项所述的破壁剂组合物在卵囊的应用。

7.根据权利要求6所述的破壁剂组合物在卵囊的应用，其特征在于，应用步骤如下：

(S1)获取纯化处理后的卵囊液，然后加入权利要求1-2或3-5中任意一项所述的破壁剂组合物，通过搅拌或涡旋混合，然后静置；

(S2)取静置不同时间段的卵囊悬浮液置于显微镜下，观察卵囊形态变化并与空白组对照分析渗透情况。

8.根据权利要求7所述的破壁剂组合物在卵囊的应用，其特征在于，所述步骤(S1)中的纯化步骤如下：

(Ⅰ)取卵囊液，进行离心、沉淀；

(Ⅱ)除去上清液，加入饱和盐水重悬沉淀，离心；

(Ⅲ)将含有卵囊液的上层液体移入装有注射水的离心管，再次离心，获得卵囊沉淀液；

(Ⅳ)将卵囊沉淀液移入装有注射水的离心管，重复上一步骤几次，最后获得不含有消毒液成分的卵囊液。

9.根据权利要求8所述的破壁剂组合物在卵囊的应用，其特征在于，在所述步骤(Ⅳ)中重复的步骤为三次。