[发明专利]一株多粘类芽孢杆菌及其在梨树病害防治中的应用

说明书

本发明公开了一株多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）FX1及其应用，所述菌株已于2020年9月18日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.20680；多粘类芽孢杆菌属于我国第一级免做安全鉴定的菌种；菌株FX1及其生防菌剂对梨树上的主要病原真菌具有较强的抑制活性，室内能抑制炭疽病斑的扩展，在田间也可抑制炭疽病、轮纹病、黑斑病、腐烂病的发生，对枝干上的腐烂病也有促进愈合作用；利用本菌株及其制剂能够减少田间化学农药的使用，保证了生态环境安全和果品质量安全，具有良好的社会和经济效益，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株多粘类芽孢杆菌及其在梨树病害防治中的应用。

背景技术

梨是世界性主要水果之一。近几年我国梨树的栽培面积在90万公顷以上，产量稳定在1600万吨左右，均占世界的三分之二以上，梨产业的健康发展对我国甚至世界水果行业的发展至关重要。病害是限制梨产业健康发展的重要因素之一，我国梨树以炭疽病、轮纹病、腐烂病、黑星病等真菌病害为害为主。炭疽病为害叶片果实，2008年在梨果重要产地安徽省砀山县大爆发，病果率高达70%以上，果农损失惨重。近年来炭疽病造成南方梨产区发生早期落叶现象，严重影响梨树翌年的开花结果，炭疽病已成为我国梨产区重点防治对象。轮纹病为害枝干、叶片和果实，发生严重时枝干发病率达100%，病果率可达30％～50％，贮藏1个月后几乎全部烂掉。腐烂病为害枝干，具有发病率高、发生区域广、难以控制的特点，发病严重的梨园，树体病疤累累、枝干残缺不全，甚至造成大量死树或毁园。

我国农作物病害防治长期以喷施化学药剂为主，化学农药的长期使用使病原菌产生抗性，导致用药量持续加大，防效逐年降低，给生态环境和农产品质量安全带来严重负面影响。生物防治利用有益微生物控制病原微生物，对环境安全无污染，在绿色防控中发挥重要作用。目前除了黑星病外，我国梨树上登记的防治药剂极少，尤其生防微生物还未有登记。持续开发、挖掘高效生防微生物资源对保护环境和农业安全健康生产意义重大。

多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）属于我国第一级免做安全鉴定的菌种，是Ash等人于1994年从原来的芽孢杆菌属中重新划分归类的菌属，也是重要的植物根际促生菌。目前国内登记了13个多粘类芽孢杆菌的母药和杀菌剂产品，在大田作物和果蔬上广泛使用，可防治小麦赤霉病、水稻纹枯病、黄瓜角斑病、西瓜炭疽病、番茄青枯病等，还未在梨上登记使用。

本发明以梨树主要真菌病害为靶标，从生防微生物中筛选到具有较强拮抗活性的多粘类芽孢杆菌，初步制备了生防菌剂进行应用，为果树病害的生物防治提供新的资源。

发明内容

本发明的目的是提供一株具有广谱抗菌效果的多粘类芽孢杆菌，该菌株对多种梨树病原真菌表现显著的拮抗效果，可弥补目前公开的专利中对于梨树病害生物防治的不足，在生物农药技术领域具有广泛的应用前景。

本发明实现的技术步骤：

采用稀释涂布分离法从果树根际土壤中分离筛选获得生防菌株FX1，该菌株在固体平板上对梨炭疽病菌、轮纹病菌、腐烂病菌和黑斑病菌均表现较强的拮抗效果。采用菌落菌体形态观察、生理生化指标、16S和gyrB基因序列测定等方法，鉴定FX1为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）FX1。菌株于2020年9月18日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101），保藏编号为CGMCC NO. 20680，其序列如SEQ ID NO:1所示。

所述菌株在NA培养基上的菌落特征：表面光滑无褶皱，乳白色，不透明状，菌体呈杆状，革兰氏染色呈阴性，可产芽孢。

本发明所述的多粘类芽孢杆菌的应用，以该菌株为基础制备成生防菌剂，用于但不仅限于防治梨炭疽病、梨轮纹病、梨黑斑病、梨腐烂病等真菌病害。